A progeszteron és ösztrogén receptorok expressziójának vizsgálata a juh endometriumában

A progeszteron és ösztrogénreceptorok expressziójának vizsgálata normál étrenddel és kiegészített étrenddel táplált juhok endometriumában

A progeszteronreceptorok expressziójának vizsgálata az anyajuhok endometriumában normál és kiegészítő étrenddel

*, ** Adriana Vasconcellos C.; ** Marco Paredes H.; ** Daniela Núñez R.; ** Eduardo Barrientos V.; ** Yoselyn Olmazábal S. & ** Javiera Navarrete V.

* Adósság. az alaptudományok orvostudományi kara, La Fontera Egyetem, Temuco, Chile

** LIMBA, Állat-biotechnológiai Kutatólaboratórium, Universidad de La Frontera, Chile.

KULCSSZAVAK: Araucana kreol juhok, reproduktív rendszer, juhok etetése.

KULCSSZAVAK: Araucana kreol juh; Szaporító rendszer; Juheledel.

BEVEZETÉS

ANYAG ÉS MÓDSZER

8, 2–4 éves Criolla Araucana juhot használtak a Maquehue kísérleti mezőben (Araucanía régió) tartva, amelyeket két egyenlő csoportba osztottak. Mindkét csoportot kevert gyepen tartottuk, évelő rozsfűvel és fehér lóhere mellett (standard étrend). Ezenkívül az egyik csoport napi hozzáférést kapott a legeltetés után egy 250 g/nap zab gabona és 30 g/nap nyersfehérje kiegészítéshez (kiegészített étrend).

Az ösztrikus ciklus stádiumát anamnézis, szövettani vizsgálat és a vér progeszteron- és ösztrogénkoncentrációjának mérése igazolta (az adatokat nem közöljük). Feláldozás után a reproduktív rendszert eltávolítottuk, azonnal elválasztva a két méhszarvat, amelyek közül az egyiket vizes Bouin-ban rögzítettük immunhisztokémiai vizsgálat céljából, a másikat pedig folyékony nitrogénben fagyasztottuk be az RNS kivonásához.

endometriumában

Láncindítók beszerzése RE és RP amplifikációhoz Real Time RT-PCR segítségével. A valós idejű PCR-analízishez használt primereket (I. táblázat) a juh ER cDNS-szekvenciáiból származtuk, amelyek az Országos Biotechnológiai Információs Központ webszerverén elérhető GenBank adatbázisban találhatók (http: //www.ncbi.nlm). nih.gov). A b-aktin cDNS amplifikálásához használt primereket (I. táblázat) a Dzidic-től szereztük be et al., (2004). Az indítók bioinformatikai tervezését a "Primer 3" programmal (http://primer3.sourceforge.net/) végezték el.

Az ösztrogén és a progeszteron receptorok immunhisztokémiai elemzése felnőtt juhok endometrium szövetében táplálékkiegészítővel és anélkül is fenntartva, mindkét juhcsoportban mindkét receptorral szemben immunhisztokémiai reakciót mutat (1. és 2. ábra). Az immunreaktív jelek különösen kiemelkedőek a mag szintjén az endometrium mirigyek sejtjeiben és az endometrium carunculáris mirigyes területein elhelyezkedő sztrómasejtekben (1. és 2. ábra). Részleges immunreakció figyelhető meg a bélés hám sejtjeiben is (1A. És 2A. Ábra). Nagyobb mennyiségű immunreaktív sejt figyelhető meg, valamint nagyobb mértékű mindkét receptor márka intenzitása juhok endometrium szövetében, kiegészítéssel, összehasonlítva a szokásos étrenddel tápláltakéval (1. és 2. ábra). Az RP és ER transzkriptumát kimutattuk a standard táplálékkal etetett juhok és a kiegészített étrend endometriumából kivont összes RNS-ben (3. ábra).

1. ábra Kiegészítetlen étrendű (A és C) és kiegészített (B és D) juhok endometriumában az ER immunhisztokémiai expressziója. Kiemelkedik az immunreakció a stromális sejtekben (A és B) és a mirigy hámjában (C és D) (vastag nyíl). Az immunreaktivitás hiányát az endometrium hámjában és a mirigy hám egyes sejtjeiben is jelzik (vékony nyíl). 1 A és 1 B ábra (400X), 1 C ábra és 1D (1000X).