A Ziziphus jujuba Ceratitis capitata (Wiedemann) vonzó aktivitásának vizsgálata
Anyagok és metódusok
Növényi anyag. Minták vétele a Zizyphus jujuba (1. kép) Közvetlenül a Valenciában (Spanyolország) található fákból készül.
Vonzási teszt. A vonzerőteszteket rovarokban nevelkedett legyekkel végzik. Az alkalmazott környezeti feltételek állandóak; a fényperiódus 16: 8 (világos: sötét), 26 ± 1ºC hőmérséklet és 60 ± 10% relatív páratartalom mellett. A felnőttek C. capitata Élesztő-autolizátum (Sigma, Madrid) és szacharóz keverékével táplálkoznak 1: 4 arányban (tömeg/tömeg). Míg a lárvák búzakorpa, sörélesztő, szacharóz, nipagin, nipazol, víz és sósav (20: 5: 1: 0,5: 0,5: 0,5: 10: 0,1) keverékével táplálkoznak.
Gyarmata C. capitata 30 * 30 * 20 cm-es metakrilát-ketrecekben tartják. (2. fénykép), ahol a legyek felnőtt fázisukban maradnak. A nőstények a tojásokat a ketrec egyik oldalán elhelyezett hálón keresztül rakják le. A petesejtek egy vízzel ellátott tálcába esnek, ahonnan pipettával gyűjtik össze
Pasteur és mesterséges étrendre vetik, ahol kikelnek és fejlődnek. Amikor a lárvák fejlődése hamarosan véget ér, és a kátyúk befejeződnek, a lárvák tápláléktálcáját egy talajjal ellátott tálcába helyezik, hogy a lárvák kiugorjanak és eltemethessék magukat, hogy kialakuljon a báb. Ezeket a bábokat gyűjtik össze, hogy egy új ketrecbe tegyék, ahol az új generációt alkotó felnőttek ismét előkerülnek.
A ketrecek 30x30x30cm fémek (2. kép), 1 mm-es fém hálós falakkal, fém talppal és metakrilát fedéllel a tisztításhoz való hozzáférés megkönnyítése érdekében. Az egyik oldalán van egy szövethüvelyes nyílás, amely lehetővé teszi a legyek kezelését.
A vizsgálatokat 2 napos és 5 napos legyekkel végzik. A fiatal legyek (2 napos legyek) és a felnőtt legyek (5 napos legyek) vonzerejének ellenőrzésére az ételt az 1., illetve a 4. napon eltávolítják a ketrecből.
Minden teszt 3 ismétlését és vízzel végzett ellenőrzést hajtunk végre. Ehhez minden egyes ketrecbe 30 hímet és 30 nőstényt visznek be; összesen 4 ketrecet használunk minden nap, amikor egy vonzerőtesztet végeznek.
A legyek 1 órán át maradnak a vizsgálati területen, hogy alkalmazkodjanak az új környezeti feltételekhez, és elkerüljék a rovarok befogása és a vizsgálati területre történő átvitel okozta stresszt.
Ezután mindegyik ketrecbe petri-csészét helyeznek; Az 1. ketrecben egy vízbe áztatott fogpaplan vagy pamut kanóc kerül, amely kontrollként szolgál a vizsgálatokhoz, összehasonlítva a gyümölcs és a páratlan aromájú, de nedves vonzerőt. A 2., 3. és 4. ketrec minden tányéron egy darab érett gyümölcsöt tartalmaz.
Amint a legyek érintkezésbe kerülnek a gyümölccsel, fél órán át hagyják megszokni a gyümölcs illékony összetevőit, és ettől kezdve minden ketrecet 10 percenként megszámolnak, a hímeket és nőstényeket feljegyzik. kerülnek a gyümölcs tetejére, valamint az elhullott legyek száma is.
Levegőztetési teszt
illó
Az illékony anyagok kinyerése érdekében a gyümölcsöt egy nyitott üveghengerbe helyezzük, amelynek egyik vége egy nulla levegőgenerátorhoz van csatlakoztatva, a másik végén pedig egy 8 cm x 0,6 cm hosszú termikus deszorpciós csőhöz csatlakozik. 200 mg Tenax TA-val mint abszorbens.
Levegőztetés előtt egy mintát adunk át "nulla levegő" a hengeren keresztül 1 liter/perc áramlással 5 percig levegőztetni a palackot, és hogy ne tartalmazzon korábbi elemzett mintákat; a térfogat 5 L lesz.
Amint a gyümölcs bejut a hengerbe, az áramlást 3 percig 1 L/min értéken tartjuk. Ezután a mintacső a henger végére kerül, és az áramlást 0,1 l/perc-re csökkentik. A mintavételi időt 30 percig tartják.
Ezt a folyamatot egyszerre négyszer megismételjük, négyet az egész gyümölccsel és további négyet a törött gyümölccsel.
Illékony vegyületek elemzése
A Tenax csöveken adszorbeált vegyületeket termikus deszorpcióval, gázkromatográfiával és tömegspektrometriával (TD/GC/MS) elemeztük.
A termikus deszorpciót a következő körülmények között hajtották végre:
- A minta elsődleges deszorpciója: A mintát 10 percig 300 ° C hőmérsékletnek tettük alá, miközben a csövön keresztül áthaladt ez idő alatt a hélium áramlása 100 ml/perc volt. A bemeneti osztás 1,5 ml/perc volt, és igyekezett a lehető legkisebb lenni
a mintavesztés elkerülése érdekében.
- A csőből vett minta kerül megrendezésre a "hideg csapda" Tenax TA ® -val töltött kvarc, amely az elsődleges deszorpció során körülbelül 30 ° C hőmérsékleten marad.