A COVID-19 laboratóriumok kimutatására szolgáló vizsgálatok típusai

COVID-19

A COVID-19 kimutatására szolgáló vizsgálatok típusai

A COVID-19 betegségre vonatkozóan eddig számos diagnosztikai teszt áll rendelkezésre. Ebben a blogbejegyzésben arra összpontosítunk, hogy bemutassuk a betegség észlelésében, szűrésében és nyomon követésében alkalmazandó jellemzőket és főbb előnyöket.

szolgáló

  • 1. Bemutatkozás
  • 2) Fordított transzkripció és polimeráz láncreakció (RT-PCR)
  • 3) Oldalsó áramlás/kolloid immunokromatográfia
  • 4) ELISA típusú immunvizsgálatok
  • 5. Következtetések

1. Bemutatkozás

Számos molekuláris technika fejlődik ki, a laboratóriumi vizsgálatoktól kezdve a COVID-19-ben szenvedő betegek diagnosztizálásáig és kezeléséig. Ezek a technikák, jóllehet a kutatók és klinikusok által jól ismertek, valamint az antitest- és antigénvizsgálatok, az általános közösség számára viszonylag ismeretlenek lehetnek. Ez a blogbejegyzés azért készült, hogy leírja és elmagyarázza a jelenleg alkalmazott fő COVID-19 diagnosztikai tesztek alapelveit.

két) Fordított transzkripció és polimeráz láncreakció (RT-PCR)

A PCR egy nagyon elterjedt technika, amelyet a kutatásban és a diagnosztikában az elmúlt 30 évben alkalmaztak (és használnak) a genetikai információk kimutatására. Az RT-PCR ennek a technikának a változata az RNS jelenlétének kimutatására. Jelenleg ezt a technikát használják tesztként a SARS-CoV-2 vírus jelenlétének kimutatására. Ezt a fajta tesztet gyakran használták első vonalbeli tesztként a COVID-19 esetében, mivel közvetlenül tesztelik a vírus RNS jelenlétét.

Az RT-PCR tesztek igen gyors, érzékeny és megbízható, képes 3-4 óra alatt eredményt produkálni, bár ez általában hosszabb időt vesz igénybe, ha a mintákat először speciális külső laboratóriumokba kell küldeni (átlagosan 6-8 óra). Számos diagnosztikai és kutatócég gyárt RT-PCR termékeket, teszteket és gépeket a technológia széles körű elérhetővé tétele érdekében. Néhány RT-PCR tesztet „all-in-one” készletként fejlesztenek ki, csökkentve a laboratóriumi kezelést és a szennyeződés lehetőségét.

Hogyan működik?

A minta összegyűjtése után a fehérjéket és más molekulákat el kell távolítani, csak a RNS. Ez egy személy genetikai anyagának keveréke lesz, valamint bármilyen vírusos RNS, amely jelen lehet.

A készlet enzimjei átírják az RNS-t a DNS-be, amelyet amplifikálnak, hogy lehetővé tegyék a vírus detektálását egy hő-ciklus segítségével, amely hőmérsékleti programot állít elő, és hozzávetőlegesen 35 milliárd másolat vírus DNS-t állít elő az eredetileg jelenlévő vírusos RNS-szálakhoz.

Használt fluoreszkáló markerek képesek megkötni az amplifikált DNS-t és fényt termelni, amelyet a gép leolvashat a teszt eredményének előállításához. Ha az előállított fény intenzitása eléri egy bizonyos küszöbértéket, akkor azt eredményekkel osztályozzák pozitív. A fluoreszcencia-küszöb elérése előtt szükséges PCR-hőmérsékleti ciklusok számát feljegyezzük, és ez becslést ad a beteg mintájában jelenlévő vírus mennyiségéről.

Először a vírusos DNS-t 94 ° C-ra melegítjük, elválasztva a DNS két szálát. A reakciót ezután 55 ° C-ra hűtjük, ez lehetővé teszi a komplementer DNS (primerek vagy primerek) kis részeinek a vírus DNS-hez való kötődését. Végül a hőmérsékletet 72 ° C-ra emeljük, hogy a Taq-polimeráz megnyújthassa ezeket a DNS-szálakat. És ily módon új PCR-ciklus kezdődik.

Mit detektál az RT-PCR teszt?

Az RT-PCR detektálja, hogy van-e vírusos RNS a beteg mintáiban. Ezt a vírus genetikai anyagának, általában a fehérjének a régióinak amplifikálásával teszi Tüske, a fehérje N hullám boríték a vírusnak. Az RT-PCR eredmény jelzi a DNS-kimutatási küszöb kimutatásához szükséges ciklusok számát oly módon, hogy minél több vírus van a mintában, annál kevesebb ciklus szükséges a jel megszerzéséhez. Ezeket a mintákat általában az orrból vagy a torokból veszik hosszú vagy rövid törlőkendőkkel.

Mit jelent a kapott eredmény?

Az RT-PCR teszt rendkívül érzékeny, és eredménye információt nyújt arról, hogy a vírus jelen van-e a betegben.

Pozitív teszt eredmény: - A pozitív PCR-eredmény azt jelenti, hogy az a személy, akitől a mintát gyűjtötték jelenleg fertőzött a vírus által.
Negatív teszt eredmény: - A negatív PCR-eredmény azt jelentheti, hogy: az a személy jelenleg nem fertőzött vagy a vírus nincs jelen a vírusban a mintavétel helye, hamis negatív is lehet a következménye gyenge minőségű minta vagy mi az túl korán vagy túl későn fertőzésben a vírus replikációjának kimutatására. Éppen ezért a negatív vizsgálati eredmények miatt néhány nappal később új betegmintákat kell venni, hogy csökkentse annak esélyét, hogy a fertőzött személy tévesen hiányzik.

Az RT-PCR teszt nvagy képes felismerni, hogy valakinek volt-e vírusa és felülmúlta a COVID-19 betegséget, mivel csak akkor észleli, amikor aktív vírus van.

Előnyök és korlátozások

  • - Az RT-PCR robusztus technika.
  • - Mivel az RT-PCR annyira elterjedt a laboratóriumokban, a vírus jelenlétének kimutatására már rendelkezésre áll a technológia.
  • - Az RT-PCR képes felismerni a folyamatban lévő fertőzéseket, lehetővé téve az egészségügyi személyzet számára, hogy ki tudja fertőzni, ki és ki nem.

  • - Az RT-PCR a vírus kimutatásán alapul, így számolás céljából hiányozni lehet azokat a betegeket, akik levetették a vírust és felépültek a betegségből.
  • - A vírus eloszlása ​​a légutakon keresztül változik a betegek között, így még akkor is, ha egy személy fertőzött, a vírus néha csak köpetben vagy orr-garat törlőben detektálható, de nem feltétlenül mindkét helyen egyszerre.
  • - A COVID-19 RT-PCR-jével csak azt lehet megállapítani, hogy egy személy fertőzött-e éppen ezzel a koronavírussal. Nem adhat információt más betegségekről vagy tünetekről.