A ct-ii lipázinhibitor, egy ehető gyógynövény kivonat, elhízásellenes hatása, név
Összegzés
CÉL: A CT-II, a Nomame Herba kivonat gátló hatásainak vizsgálata in vitro a magas zsírtartalmú táplálékkal táplált patkányok in vitro lipáz aktivitására és elhízására .
TERVEZÉS: A CT-II lipáz aktivitásra gyakorolt gátló hatásának tesztjét a tápközeg CT-II-vel, sertés hasnyálmirigy-lipázzal és trioleinnal történő inkubálása után felszabaduló szabad zsírsavak mérésével végeztük (1. kísérlet). In vivo kísérletek során sovány vagy elhízott patkányokat (570–718 g) 60% zsírtartalmú, magas zsírtartalmú étrendet etettek CT-II-vel vagy anélkül 8 hétig (2. kísérlet), 14 napig (3. kísérlet) vagy 12 hétig. (4. kísérlet), ill.
MÉRÉS: a testtömeg, az ételbevitel, a szervtömeg (a zsír zsír, a máj, a szív és a vese) és a plazma paraméterek (trigliceridek, teljes koleszterin, glükóz, AST, ALT és inzulin), a széklettermelés összes zsírjának és az összes koleszterin időbeli alakulása. mért. Májszövettani vizsgálatokat is végeztek.
Eredmények: A CT-II dózisfüggő módon gátolta a sertés lipáz aktivitását in vitro (1. kísérlet). A test és a máj súlya csökkent, a máj szövettani vizsgálata pedig a zsírmáj javulását mutatta a CT II-vel kezelt állatokban (2. kísérlet). A CT-II dózisfüggő módon szignifikánsan gátolta a testtömeg-növekedést és a plazma trigliceridszint-emelkedést, anélkül, hogy befolyásolta volna a magas zsírtartalmú étrendet fogyasztó sovány patkányok táplálékfelvételét. Az emelkedett plazma AST és ALT szint szintén csökkent (3. kísérlet). Amikor a kövér táplálékkal táplált elhízott patkányokat legfeljebb 6 hónapig CT-II-vel kezelték, a testtömeg kezdetben csökkent, majd a súlygyarapodás jelentősen megszűnt. Az összes testzsír is szignifikánsan csökkent, és a plazma AST és ALT jelentős csökkenését figyelték meg (4. kísérlet).
KÖVETKEZTETÉSEK: Ezek az eredmények bebizonyították, hogy a CT-II lipázinhibitor hatékonyan megelőzi és enyhíti az elhízást, a zsírmájat és a hipertrigliceridémiát magas zsírtartalmú étrenddel etetett patkányokban.
Hozzáférést a
Bevezetés
A hasnyálmirigy-lipáz a legfontosabb enzim a trigliceridek emésztéséhez az étrendben. 1 A lipáz inhibitor alkalmazását korábban az elhízás kezelésének tárgyát képezték. Az Orlistat (Ro 18-0647), a Streptomyces toxitricini-ből származó hidrogénezett lipsztatin-származék, a gyomor, a hasnyálmirigy és a karboxilészter lipáz 2 erős gátlója, és bebizonyosodott, hogy hatékony az emberi elhízás kezelésében. 3, 4, 5 A lipázinhibitorok létezését különféle élelmiszeripari termékekben vizsgálták, és ezeknek az inhibitoroknak a jelenlétéről beszámoltak gabonafélékben, búzakorpában és búzacsírában 6, valamint a szójababban 7, 8. A lipázinhibitorokat olyan természetes termékekben is keresik, mint a kínai gyógyszerek és a különféle gyógynövények. 9.
Hüvelyes növény, Cassia mimosoides L. var. nomino Makino (Nomame Herba), Japánban és Kínában termesztik, és Japánban hagyományosan teaként fogyasztják. A természetes termékek közül a lipázinhibitorok kiválasztása során a Nomame Herba kivonata figyelemre méltó gátló hatást mutatott a lipázra. Jelen tanulmányban ennek a kivonatnak, a CT-II-nek az in vitro lipázaktivitásra és az elhízás elleni hatásokra gyakorolt gátló hatását vizsgálták in vivo magas zsírtartalmú étrenddel táplált patkányokban. .
Mód
A CT-II előállítása
A CT-II a Nomame Herba vizes etanol-kivonatának egy része, amely főleg proantocianidint (sűrített tannin) tartalmaz. A frakció elkészítése a következő volt: 800 g száraz növény légi részét extraháltuk 10 liter 50% -os etanollal (4 liter, 3 liter, 3 liter, három extrakcióval). Az extraktumot Diaion HP 20 oszlopnak vetjük alá (Mitsubishi Chemical Corporation), 30% etanollal mossuk és 80% etanollal eluáljuk. Az eluált oldatot bepároljuk és liofilizáljuk szárazra, majd 24 g CT-II port kapunk. CT-II port használtunk keverékként in vivo kísérleti étrenddel .
A CT-II in vitro gátló hatása a lipáz aktivitására
A lipáz aktivitás vizsgálatot trigliceridek szubsztrátként történő alkalmazásával Fukumoto és mtsai. 10 Összefoglalva, a (pH 7, 4) és 1 ml tetrahidrofurán (THF) 50% -os CT-II oldat gátló hatását összekevertük egy L típusú kémcsőben (~ 18 × 120 mm) és 1 ml sertés hasnyálmirigy-oldatban. Ezután lipázt (Sigma II típus, 0,71 mg/ml fehérjeként McIlvaine pufferben) adunk hozzá, és 37 ° C-on 15 percig rázással inkubáljuk. A reakciót etanol hozzáadásával leállítottuk, és a felszabadult zsírsavakat 0,05 M NaOH-oldattal titráltuk. A vakot 50% THF alkalmazásával mértük CT-II nélkül (1. kísérlet).
A CT-II testtömegre, testzsírra és metabolitokra gyakorolt in vivo hatása
Állatok és étrend.
Nőstény Sprague-Dawley patkányokat használtunk a vizsgálatban. Különálló rozsdamentes acél ketrecekben tartották őket ellenőrzött hőmérsékleten (24 ± 2 ° C) és 12 órás világos/sötét ciklusban, szabadon hozzáférve a vízhez és magas zsírtartalmú porított étrendhez, amely 60% zsírt, 7,5% szénhidrátot, 24,5% fehérje (6,7 kcal/g), mint az előző vizsgálatban. 11 A főleg zsírtalanított szójalisztet és hallisztet tartalmazó normál étrendet extrudált étrendnek nevezik (CE-2, Clea Japan Inc.).
Eljárások.
A CT-II kezdetben lipázgátló hatást mutatott az in vitro vizsgálatban. Mivel a túlzott étkezési zsírbevitel hozzájárul az elhízás kialakulásához, a kivonat megelőző hatásait az elhízás kialakulására magas zsírtartalmú étrenddel etetett patkányokban vizsgálták. Miután alkalmazkodtunk a magas zsírtartalmú étrendhez és a laboratóriumi körülményekhez 1 hétig, a 239-251 g tömegű sovány patkányokat két csoportra osztottuk. A kontrollcsoport csak a magas zsírtartalmú étrendet kapta; A másik csoport magas zsírtartalmú étrendet kapott, 2,5% -os koncentrációban kevert CT-II-vel. A testtömeg minden héten mérésre kerül. 8 hetes CT-II kezelés után az állatokat leöltük, megmérettük a szervek súlyát, és a szerveket szövettanilag vizsgáltuk (2. kísérlet).