A proteolitikus enzimek és a szexuális absztinencia hatása a biokémiai mennyiségi meghatározásban
A proteolitikus enzimek és a szexuális
absztinencia a -glükozidáz szinteken
az emberi szemináris plazmában
Patricio Peña S 1,2, Raúl Sánchez G, Belgium Vásquez P 1,3,
Claudia Castillo K 1, Werner Miska 4
2000. december 18-án kapott. Javított változatban 2001. január 16-án elfogadva.
Finanszírozási forrás: MECE-SUP FRO-98 Program, Projekt: "A
Regionális tudományos, technológiai és termelési kapacitás. "Kutatási Igazgatóság
(9735-9820), Universidad de La Frontera Temuco és DFG-GTZ-93.2157.106.100.
Alaptudományok Tanszék, Preklinikai Tudományok Tanszék és Reprodukciós Biotechnológiai Központ, Orvostudományi Kar, Universidad de La Frontera, Temuco, Chile.
Andrológiai Tanszék, J-L-Universität Giessen, Németország.
1 orvostechnológus, 2 MCS, 3 tudományos fokozat
Ezt a vizsgálatot a következő célkitűzésekkel terveztük: 1) a normál donorok szeminális plazmájában jelen lévő α-glükozidáz referenciaértékeinek megszerzésére. 2) normál donorok spermamintáiban meghatározzuk az a-kimotripszin proteolitikus enzim hozzáadásának az a-glükozidáz aktivitására gyakorolt hatását; és 3) a nemi absztinencia időtartamának az α-glükozidáz aktivitására gyakorolt lehetséges hatásának értékelése a spermium krioprezervációs programból származó betegek soros mintáiban.
ANYAG ÉS MÓDSZER
Az Orvostudományi Kar Etikai Bizottságának konzultációja és jóváhagyása után, tájékozott beleegyezés útján, donorokat választottak ki ebbe a tanulmányba egyetemünk hallgatói és az Andrológiai Poliklinikára látogató betegek között, kizárva ebből a korábbi betegségekkel és szexuális úton terjedő alanyokat. Az α-glükozidáz értékelését rutinszerűen határozták meg a spermium krioprezerválását igénylő betegek szeminális plazmájában.
Az α-kimotripszin hatása az α-glükozidáz aktivitásra. Az a-kimotripszin 18 növekvő koncentrációit (0,1-től 10 mg/ml-ig) adtuk normál donorok (n = 6) spermiummintáihoz, amelyeket -20 ° C-on tartottak a vizsgálatig. Ezt követően az α-glükozidáz aktivitását számszerűsítettük. Az egyes donorok alapértékét korábban meghatároztuk, és 100% -nak tekintettük, hogy összehasonlítsuk azokat a mintákat kapott értékekkel, amelyekhez -chymotrypsint adtunk.
Az α-glükozidáz monitorozása sorozatban nyert szeminális plazmamintákban. Sorozatmintákat 9 páciensről gyűjtöttünk az UFRO Andrológiai Laboratórium spermium krioprezervációs programján keresztül. A mintákat három csoportba soroltuk: az 1. sz. A 2 napos absztinencia, a 2. – 4. És a 3. – 6. Napok kezdettől fogva megfelel, de mindegyiket egymás után vettük, oly módon, hogy közöttük, az absztinencia mindig 2 napnak felelt meg. A szemináris plazma feldolgozása a korábban leírtak szerint történt.
Referenciaértékek meghatározása. Normális donorokban a semleges α-glükozidáz izoform aktivitása 14,52-25,9 uU/ml (= 19,32 uU/ml; SD = 1,13; SEM = 0,16) volt paraméteres módszerekkel. Nem normál módszerek esetén a normál tartomány 15,85-23,46 µU/ml között ingadozott (1. ábra).
A proteolitikus enzimek hatása. Az α-kimotripszin 0,1 és 10 mg/ml közötti koncentrációban történő növekedése nem változtatta meg jelentősen az α-glükozidáz aktivitást (2. ábra). Figyelembe véve, hogy a normálisan ajánlott (1 mg/ml) legfeljebb 10-szeres koncentrációkat alkalmazták a szeminás plazma feloldására károsodott cseppfolyósítású betegeknél.
A szemináris plazma elemzése fontos támogatást nyújt a férfi reproduktív rendszert érintő különféle patológiák diagnosztizálásához 19. Az α-glükozidáz enzim jelenlétének mennyiségi meghatározása közvetlenül korrelál az epididymus funkciójával. Ezért a referenciaértékeket meghaladó szintek közvetlenül kapcsolódnak a fertőzésben szenvedő betegekhez, és az alacsony szintek a vas deferens obstrukciójára vagy agenesisére utalnak, közel azonos értékekkel a vazektómiás betegeknél. Ennek a technikának a klinikai laboratóriumban történő megfelelő alkalmazásához meg kellett határozni a chilei populáció normál referenciaértékeit. 50 normál szeminalis analízissel rendelkező önkéntes mintában a parametrikus statisztikai módszert alkalmazták, amely kis mintamérettel 17 alkalmazható a teljes vizsgált populációra. A normál átlagos 19,32 µU/ml (SD = 1,13; SEM = 0,16) átlagértékből kapott eredmények nagyon hasonlóak voltak az európai populációnál leírtakhoz (20 µU/ml) 16 .