Az előrehaladott colorectalis neoplasia molekuláris heterogenitása és prognosztikai vonzatai
Tárgyak
Ez a cikk frissült
Összegzés
Háttér:
Bizonytalan, hogy a szinkron colorectalis daganatok (S-CRC) preferenciálisan fejlõdnek-e generalizált DNS-metilációval, és rosszabb prognózisúak-e, mint a magányos CRC. Mivel a mikroszatellit instabilitás (MSI) daganatok megzavarhatják az S-CRC metiláció hatását az eredményre, ezzel a kérdéssel egy sor CRC-ben foglalkoztunk, amelyeket BRAF és MS státusz jellemez.
Mód:
A demográfiai adatokat, a klinikopatológiai nyilvántartásokat és a betegségspecifikus túlélést (DSS) 881 egymást követő reszekcióval végzett CRC-ben értékelték, és teljes kolonoszkópián estek át. Valamennyi daganatot a BRAF c.1799T> A mutáció és MS státusz alapján tipizáltuk, majd MSI CRC-ben szenvedő csíravonal mutáció után kutattunk.
Eredmények:
A szinkron vastagbélrákok (50/881, 5,7%) a IV. Stádiumú CRS mikroszatellit-stabil (MSS) (19/205, 9,3%, P = 0,001) és a HNPCC-vel (9/32, 28%, P c. 1799T>) voltak társítva. Az egyik mutáció (HR 2,16; 95% CI 1,25–3,73; p = 0,01) az MSS CRC halálfázisától független előrejelzője volt. Az MSI MRI-ben szenvedő betegek betegségspecifikus túlélését az S-CRC nem befolyásolta (HR 0,74, 95% CI 0,09 - 5,75, P = 0,77).
Következtetés:
A stabil mikroszatellit CRC-k rosszabb prognózissal rendelkeznek, ha S-CRC-t vagy szinkron előrehaladott adenomát diagnosztizálnak. Az SMS szinkron előrehaladott neopláziájának előfordulása és fokozott agresszivitása nincs összefüggésben a BRAF mutációval .
Fő
Két vagy több primer kolorektális karcinómát fedeznek fel az összes újonnan diagnosztizált vastagbélrákban (CRC) szenvedő 2–5% -ban (Adloff és mtsai, 1989; Passman és mtsai, 1996; Chen és Sheen-Chen, 2000; Oya és mtsai, 2003; Papadopoulos és mtsai, 2004; Latournerie és mtsai, 2008; Nosho és mtsai, 2009; Mulder és mtsai, 2011). A szinkron vastagbélrák (S-CRC) klinikai entitásként történő elismerése felhívta a figyelmet arra, hogy CRC-reszekció alatt álló betegeknél a teljes vastagbél pontos perioperatív vizsgálata kötelező. Az azonban továbbra is bizonytalan, hogy az S-CRC prognosztikai és molekuláris jellemzői eltérnek-e a magányos CRC-től.
Az S-CRC-ben szenvedő betegek jellemzőit és kimenetelét vizsgáló eset-kontroll vizsgálatok ellentmondásos eredményeket szolgáltattak. Férfi nem (Oya és mtsai, 2003; Latournerie és mtsai, 2008; Mulder és mtsai, 2011), idős kor (Passman és mtsai, 1996; Papadopoulos és mtsai, 2004; Wang és mtsai, 2004; Mulder és mtsai, 2011), az egymás mellett létező adenomák (Chen és Sheen-Chen, 2000; Latournerie és mtsai, 2008) és a rosszabb túlélés (Oya és mtsai, 2003; Nosho és mtsai, 2009; Mulder és mtsai, 2011) néhány sorozatban társultak az S-CRC-hez, de másokban nem. Ezek az inkonzisztenciák valószínűleg elfogultságot tükröznek az indexes esetek kiválasztásában, valamint a kontrollok toborzásában a magányos CRC-vel. Különösen a különböző sorozatokban előfordulhat változó prevalencia a mikroszatellit instabilitással (MSI) rendelkező rákos megbetegedésekben, amelyek többszörös elváltozásokhoz kapcsolódnak (Pedroni et al., 1999; Dykes et al., 2003.; Nosho és mtsai. hanem jobb prognózissal is (Gryfe és mtsai, 2000; Malesci és mtsai, 2007).
Tekintettel az eredmény és a különféle molekulaprofilok bonyolult kölcsönhatásaira, nyilvánvaló, hogy az S-CRC prognosztikai jelentőségét csak a CRC egyedi molekuláris alcsoportjainak elemzésével lehet biztonságosan felmérni. Ezenkívül az elemzést ki kell terjeszteni a szinkron fejlett adenomákra is, amelyek metakron CRC-vel is társulnak (Moon és mtsai, 2010). A szinkron adenómák vagy az S-CRC retrospektív keresését a perioperatív kolonoszkópiák regisztereiben végezték 881 egymást követő betegben, akiknek a reszektált CRC-t eredetileg molekuláris alosztályokba sorolták a mikroszatellit státus és a BRAF alapján. Ezután értékelték az előrehaladott szinkron neopláziában szenvedő betegek klinikopatológiai jellemzőit és eredményét.
Anyagok és metódusok
A CRC populációjának és alcsoportjainak vizsgálata szinkron neoplázia miatt
A vizsgálat célja 1000 olyan egymást követő páciens bevonása volt, akiket CRC-n végeztek reszekciós műtéten a Humanitas Klinikán és Kutatóközpontban 1998. február 2. és 2006. április 6. között. A kizárási kritériumok a következőkre korlátozódtak: (1) submucosalis invázió hiánya a patológia; (2) egy korábban reszektált vastagbéldaganat anasztomotikus kiújulása; (3) a családi adenomatózus polipózis diagnózisa; (4) CRC gyulladásos bélbetegséggel társítva. A protokollt az Intézet Etikai Bizottsága jóváhagyta, és a betegek személyes adatainak kezelésével kapcsolatos tájékozott beleegyezését a beutaló orvos vagy a vizsgálatban részt vevő más klinikusok szerezték meg. A nyilvántartások előzetes elemzésében 119 beteget (közülük egyiknek sem volt S-CRC) kizárták a hiányos vagy rossz minőségű perioperatív kolonoszkópia miatt, ami 881 alany végső vizsgálati populációjához vezetett.
Molekuláris tumor altípus
Az összes beteg daganatmintáját és az S-CRC betegek összes daganatát vizsgálták MSI-re. Az amszterdami II. És/vagy a Bethesda kritériumoknak (n = 279) megfelelő betegek BAT-26 mononukleotidját és BAT-25 mononukleotidját használtuk az MSI molekuláris markereiként (Hatch et al., 2005; Laghi et al., 2008). A DNS-t legalább 50% tumorsejtet tartalmazó parafinba ágyazott daganatokból vagy mikrodissszekciókból nyertük. A BAT-25 és BAT-26 lókuszt fluoreszcein primerekkel amplifikáltuk, és kapilláris gélelektroforézissel elemeztük (ABI PRISM 310 Genetic Analyzer, Applied Biosystems, Monza, Olaszország) (Aaltonen et al., 1998; Malesci et al., 2007).
Valamennyi MSI CRC-ben a nem megfelelő javítás (MMR) hibáját értékelték a hMLH1 (G-168-15 klón, BD Bio sciences, Buccinasco, Milánó, Olaszország), hMSH2 (FE11 klón, Calbiochem, Merk) nukleáris expressziójának hiányával. Millipore, Darmstadt, Németország) vagy hMSH6 (44. klón, BD Bio sciences) az immunhisztokémiában (Truninger és mtsai, 2005). Az amszterdami kritériumoknak (n = 10) megfelelő betegek MSS daganataiban is igazolták a nem megfelelő javító fehérje expresszióját. Az MSI CRC-ben szenvedő betegek csíravonal genetikai vizsgálatán estek át az MLH1, MSH2 és MSH6 mutációk az elsődleges rák MMR defektus szekvenálásával (Wahlberg és mtsai, 2002). Negatív mutációval rendelkező betegeknél a többszörös ligációs próba (probemix SALSA MLPA P003 MLH1-MSH2, probemix P248 MLH1-MSH2, probemix P072 MSH6, Medical Research Council-Holland, Amsterdam, Hollandia) amplifikációs elemzését végeztük.