Inzulinérzékenység prepubertális anyajuhokban normál és korlátozott táplálékkal
EREDETI CIKK
Inzulinérzékenység prepubertális anyajuhokban normál táplálkozással és táplálékkorlátozással #
Inzulinérzékenység normál és korlátozott táplálékkal rendelkező prepubertális növekvő anyajuhokban
S E Recabarren 1 *, A Lobos, P Muñoz 1, M Calvillán 1, J Parilo 1
1 Állatfiziológiai és endokrinológiai laboratórium, Állatorvostudományi Kar, Universidad de Concepción, Chillán, Chile.
Kulcsszavak: inzulinrezisztencia érzékenység juh.
Kulcsszavak: inzulinrezisztencia, inzulinérzékenység, endovenous glükóz tolerancia teszt, anyajuh, pubertás.
BEVEZETÉS
Minden élő szervezetnek szüksége van energiára a létfontosságú funkciókhoz. A napi energiafogyasztás fontos részét az anyagcsere és a hőtermelés foglalja el. Alapvető körülmények között, amikor nincsenek külön igények (növekedés, terhesség vagy szoptatás), az energiamérleg megfelel az input és a kiadás egyensúlyának. Ha a hozzájárulást a minimális napi ráfordításhoz képest csökkentik, a keletkező egyensúlyhiány arra kényszeríti az állatot, hogy energiát nyerjen a zsírok és fehérjék alkotta tároló forrásokból. Tekintettel arra, hogy a legtöbb energiát igénylő létfontosságú funkciók között a reprodukció az egyik legfontosabbnak tűnik, az energia-egyensúlyhiány azonnal hatással van rá. Ez a kapcsolat különösen fontos a pubertás előtti fejlődés során, a gonád tengelyén már megmutatkozó hatások: csökkent GnRH/LH szekréció és késleltetett pubertás.
Az elhúzódó böjt rendkívüli helyzet, amelynek metabolikus viselkedésére vonatkozó kísérleti információkat nem lehet extrapolálni olyan alacsony élelmiszer-fogyasztási időszakokra, amelyekkel a növekvő nőstény képes megbirkózni, és amely befolyásolja a szaporodási tengelyt.
Ezért a jelen munka célja az volt, hogy meghatározzuk az élelmiszer-korlátozás perifériás inzulinérzékenységre gyakorolt hatását az intravénás glükóztolerancia teszttel (TTGEV) számszerűsítve a prepubertális anyajuhokban hat hét étkezési korlátozás után.
ANYAG ÉS MÓDSZEREK
Az állatok általános kezelése. 10, a Concepcióni Egyetem Agronómiai Karának Juhtermelő Egységéből származó, augusztusban született Suffolk Down prepubertális anyajuhot használtak fel. A nőstényeket 3 hónapos korukban választották el, és pelletált takarmánnyal kiegészített természetes gyepterületekkel etették őket (Novillina, Champion). 20 hetes korukban az anyajuhokat véletlenszerűen két csoportba osztották: az egyik kontroll, a másik pedig kísérleti. A kontrollcsoport anyajuhait (n = 5, 23,6 ± 1,1 kg élősúly) etettük ad libitum, Míg a kísérleti anyajuhok (n = 5, 23,2 ± 0,5 kg élősúly) az élelmiszer-bevitel korlátozott volt, napi takarmánymennyiségű pelletált takarmányt adtak nekik, ami a testtömeg körülbelül 2% -ának felel meg. Ezt az eljárást 6 hétig, 26 hetes koráig tartották.
Negyvennyolc órával a TTGEV megkezdése előtt a juhokat a kísérleti helyiségbe vitték a jugularis véna katéterezésére a Recabarren és munkatársai (1995) által leírt módszer szerint. A háromutas szelephez kapcsolt katétert (Arrow, 18 g) glükóz infúzióhoz és vérminták gyűjtéséhez használták. A katétereket heparinizált szérummal (500 NE/ml) tartottuk az alvadékképződés elkerülése érdekében. Az előző nap szokásos vérmintákat vettek a stressz kockázatának csökkentése érdekében. A felesleges ételt a vizsgálat előtti nap 20 órájában eltávolítottuk, hogy a kísérletek előtt 12 órás böjtöt biztosítsunk.
Endovenous glükóz tolerancia teszt. Az intravénás glükóztolerancia teszt egy steril 50% -os glükózoldat infúziójából állt, 300 mg/testtömeg-kg dózisban 2 perc alatt. Vérmintákat vettünk az infúzió előtt 15 és 10 perccel, valamint az infúzió megkezdése után 0, 3, 5, 7, 10, 13, 15, 20, 23, 25, 27 és 30 perccel az inzulin és a vércukorszint mérésére . A 0. előtt és a 0. időpontban kapott mintákat használtuk a bazális plazma glükóz és inzulin koncentrációk kiszámításához. A vérmintákat heparinizált üvegcsövekbe vettük az inzulin mérésére, valamint heparinizált és fluorozott üvegcsövekbe a glükóz mérésére jégen tárolva. Ezt követően a csöveket 1000 g-on 15 percig 4 ° C-on centrifugáltuk, és a plazmát -20 ° C-on fagyasztva tartottuk az inzulin és a plazma glükóz meghatározásáig.
A glükóz és az inzulin mérése. A plazma inzulin koncentrációit RIA-val határoztuk meg a juhok laboratóriumában validált kereskedelmi készletekkel (Insulin Cout-a-Count, DPC, USA). A radioaktivitást LKB RIA GAMMA 1271 gamma spektrométeren (Wallac Oy, Finnország) határoztuk meg. A minimális kimutathatósági szint, amelyet a kontrollpuffer 90% -aként határoztak meg, 3 µIU/ml volt, az intra-assay és az assay közötti variációs koefficiens 5, illetve 8% volt az 5-300 µIU tartományban.
A glükózt kereskedelmi készletekkel (Wiener Lab, Chile) mértük glükóz-oxidáz módszerrel, abszorbancia mérésével 505 nm-en Spectronic 21D spektrofotométerrel (Milton Roy, USA). Az intra- és inter-assay együttható kevesebb volt, mint 2, illetve 5%.
Az inzulinérzékenységi index kiszámítása. Az inzulinérzékenységi index kiszámításához a Matsuda és De Fronzo (1999) által leírt képletet használtuk, ahol:
ISI-Composite = 10000/((átlagos bazális glükóz-koncentráció x átlagos bazális inzulin-koncentráció) x (átlagos glükóz-koncentráció 0-30 perc x átlagos inzulin-koncentráció 0-30 perc).
Ezenkívül az inzulin-válasz görbe alatti területet (AUC, ng/ml/30 perc) meghatároztuk az alap inzulin koncentráció görbéje alatti terület és a TTGEV során stimulált inzulin görbe alatti terület különbségeként trapéz képlettel és a glükóz rendelkezésre állási arányát (kg,%/perc) a glükóz beadásának utáni 10 és 20 perc közötti csökkenés meredekségével.
Statisztikai elemzés. Az alap glükóz- és inzulinadatokat, az inzulinérzékenységet (ISI-Composite), a görbe alatti területet és a glükóz-felhasználási állandót először a variancia homogenitására elemeztük, Barttlet-teszttel, majd a "t" teszttel nem párosítva a GBStat v.6 számítógépes program. P-nek számított
Az 1. táblázat az átlagos testtömegeket, a plazma glükózt és az alap plazma inzulint mutatja minden csoport esetében 26 hetes korban (a kísérleti csoportban hat hetes táplálékkorlátozás után). A kontrollcsoportban az anyajuhok súlya nagyobb volt, mint a kísérleti anyajuhoké (P
Átlagos (± standard hiba) testsúly, plazma glükóz és plazma inzulin koncentráció a prepubertalis 26 hetes anyajuhokban. A kontrollcsoportot etettük ad libitum és a kísérleti csoport számára a testtömeg 2% -ának megfelelő ételt kínáltak 6 hétig, 20 hetes kortól kezdődően.
Az 1. ábra mutatja a plazma átlagos glükóz- és inzulinkoncentrációit a TTGEV során mindkét csoportban. A glükózkoncentráció növekedése a glükózinfúzió 3 percnél csúcsosodása következménye. Ezt követően a plazma glükóz 30 percig csökkent, hasonló lejtéssel mindkét csoportban: 1,56 ± 0,47, illetve 1,98 ± 0,27%/perc. A korlátozott csoport nagyobb inzulin szekréciót mutatott a glükóz hatására, mint a kontroll csoport. Ez a fajta viselkedés azt állapította meg, hogy a kísérleti anyajuhok ISI-C értéke 636,43 ± 125,66 volt hat hetes táplálékkorlátozás után, míg a kontroll anyajuhokban 1528,18 ± 297,61 volt (a glükózra adott P válasz felismerhető a válaszgörbe alatti területként A kísérleti anyajuhok AUC-értéke 642,16 ± 140,04 és magasabb volt (P