Közepes agyi artéria elzáródási technika a stroke utáni depresszió kiváltására patkányokban Protokoll

Összegzés

Itt bemutatunk egy protokollt a stroke utáni depresszió kiváltására patkányokban a középső agyartér elzárásával a belső nyaki artérián. A Porsolt kényszerúszási tesztet és a szacharózpreferencia tesztet használjuk az indukált depressziós hangulati állapotok megerősítésére és értékelésére.

Absztrakt

Bevezetés

A stroke a negyedik az elkövető halálos megbetegedések listáján az Egyesült Államokban 1, 2, 3, míg a fejlett országokban a felnőttek fogyatékosságának többségét okozza. Ez a stroke-ot a világ legfontosabb egészségügyi problémái közé sorolja. A stroke-ban túlélők normális állapota ritka, a túlélő áldozatok körülbelül 15-40% -a szenved állandó fogyatékossággal, 20% -uk intézményi ellátást igényel 3 hónappal a stroke kezdete után 5, és a 6 hónapos túlélők körülbelül egyharmada, akiknek másokra van szükségük, hogy átéljék minden nap 6. Nyilvánvalóan a stroke a nemzeti egészségügyi kiadások növekedését is jelenti 7. Az American Heart Association becslései szerint az agyvérzéssel összefüggő költségek az Egyesült Államokban 2010-ben meghaladták az 50 milliárd dollárt 8 .

A stroke nemcsak hosszú távú kárt okoz az egyénekben, de néhány túlélő általában érzelmi és viselkedési rendellenességektől szenved, például demenciától, fáradtságtól, szorongástól, depressziótól, delíriumtól és 9., 10., 11., 12., 13., 14. agressziótól. A stroke után a legtöbbször visszatérő pszichológiai következmény a stroke utáni depresszió (PSD), amelyet a túlélők körülbelül 40-50% -ánál diagnosztizáltak, 15, 16, 17. A stroke okozta depresszió fokozott morbiditást és mortalitást okoz 18, 19, 20, 21, 22. A PSD kórélettana nem teljesen ismert, de úgy tűnik, hogy ezt több tényező okozza, és összefügg a fogyatékossággal, a kognitív károsodással és a sérülés helyével 23 .

A fokális agyi ischaemia patkánymodellje, amelyet Mcao készített, a 24., 25., 26., 27. stroke legelterjedtebb állatmodellje. A PSD patkányokban történő indukciójának bemutatásával a CSF ICA-n keresztüli elzáródásával olyan technikákat alkalmaznak, amelyek minimalizálják a mortalitást és a variabilitást az MCAO-modellben 28 .

Ennek a protokollnak a fő célja az, hogy meghatározza a patkányok PSD kiváltásának lépéseit az MCA elzárásával az ICA-n keresztül, az MCAO módosított modelljén keresztül, amely csökkenti a mortalitást és változékonyságot eredményez 28. Konkrét célkitűzései közé tartozik a neurológiai és szövettani vizsgálatok elvégzése (a neurológiai súlyossági pontszám [NSS], az infarktus zóna térfogatának és az agyi ödéma meghatározása) az MCAO hatékonyságának igazolására, valamint a viselkedési tesztek használata az MCAO eljárás hatásának vizsgálatára az érzelmi rendellenességek, elsősorban a PSD kialakulása.

Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.

Jegyzőkönyv

Az izraeli Negev Ben-Gurion Egyetem Állatgondozási Bizottsága jóváhagyta a protokollban alkalmazott összes kezelési és vizsgálati eljárást.

1. patkányok előkészítése a kísérleti eljáráshoz

Jegyzet: Válasszon felnőtt hím Sprague-Dawley patkányokat, amelyek súlya 300-350 g.

1. A patkányokat ketrecenként négyszer, 22 ° C-os, 40% -os páratartalmú Vivariumban helyezzük el, megfordított 12 órás fény/sötét ciklus (reggel 8 órakor kikapcsol), valamint korlátlan hozzáférés az élelemhez és a vízhez.
2. A patkányokat véletlenszerűen két csoportba sorolják, nevezetesen egy MCAO csoportba (n = 24) és egy álcsoporthoz (n = 19).

2. patkányok előkészítése műtétre

3. műtét (MCAO technika)

Jegyzet: Végezze el a műtétet Boyko et al. 28. és használja McGarry és mtsai által biztosított eszközöket. 29. és uluç et al. 30 .

1. Hajtsa végre a ventrális középvonal metszését és boncolja fel a felületes fasciát.
2. Óvatosan végezzen éles, erőteljes boncolást a három háromszög alakú izomban (szternohioid, digasztrikus és szternomasztoid izom) a carotis artériák (TBI, ICA és közös carotis artéria [CCA]) azonosításához.
3. Óvatosan boncolgassa és tegye ki a megfelelő CCA-t és ICA-t.
4. Válasszuk el a jobb CCA-t és az ICA-t a vagus idegtől.
   Jegyzet: A nyaki artériák azonosításával a 3.2 lépésben előírtak szerint az ICA-t a CCA ágainak feleként ismerik el a TBI mellett.
5. Helyezzen monofil szondát (nylon-tompa vagy szilikon bevonatú 4-0 nylon) közvetlenül az ICA-n keresztül,

4. műtét utáni gyógyulás

1. Adjon 5 ml 0,9% -os sóoldatot intraperitoneálisan minden patkánynak, közvetlenül a műtét után, a dehidratáció megelőzése érdekében.
2. A fájdalomcsillapítást feltétel nélkül adják be a műtét utáni első napon; meloxicam 1 mg/kg SQ q24 óra. adjon hígított dipiront (0,5 g 400 ml ivóvízben oldva) azoknak a patkányoknak, amelyek fájdalom tüneteit mutatják az első 3 napban.
3. Bármely roham patkányát feláldozza (a rohamokat az agyödéma vagy az agyi vérzés okozta megnövekedett koponyaűri nyomás okozza 28).

5. neurológiai súlyossági pontszám 31

Jegyzet: Ezt az eljárást két megfigyelő végzi, akik nem vesznek részt a műtéti eljárásban; 0-4 32 kumulatív pontszámmal tesztelik a neurológiai hiányosságokat és a motoros hiányosságokat. Ennek a pontszámnak az értékelése különböző időközönként végezhető; ebben a vizsgálatban 50 perccel, 24 órával, 7, 15 és 30 nappal a műtét után hajtották végre. Itt vannak a Senna értékelésének lépései. Bár ebben a helyzetben ez nem szükséges, ez a pontszám szükséges a rágcsálók stroke-jának meghatározásához a kezelés beadása érdekében.

1. Helyezze a patkányt egy kerámia padlóra, és hagyja szabadon mozogni 1 percig.
2. Óvatosan húzza vissza a patkányt a farkánál fogva, és az alábbiak szerint értékelje.
   1. Pontozza a patkányt 0 ponttal, ha nincs neurológiai hiány.
   2. Értékelje a patkányt 1 ponttal az elülső hajlításhoz.
   3. Értékelje a patkányt 2 ponttal az ellentétes gyenge elülső fogásért.
   4. Értékelje a patkányt 3 ponttal, hogy körbejárja a paretikus oldalt, amikor a farok eldobja.
   5. Értékelje a patkányt a spontán 32 kör 4-es pontszámával .
      Jegyzet: Ha az egyiknél több reakciót észlelnek, akkor a magasabb pontszámú akciót részesítik előnyben.

   ---