Nem invazív cfDNS prenatális teszt - Down-szindróma
Nem invazív cfDNS prenatális teszt
2018-as frissítés
Fontos megjegyzés az ebben a cikkben használt terminológiával kapcsolatban
Bevezetés
Ebben a cikkben áttekintjük a prenatális aneuploidia szűrés jelenlegi irányelveit, elemezzük a cfDNS szűrési technológiát és a teszt jellemzőit, megvizsgáljuk a hamis negatív és hamis pozitív eredmények okait a cfDNS-sel, és foglalkozunk a cfDNS teszteléssel kapcsolatos jelenlegi klinikai dilemmákkal.
Az aneuploidia szűrés jelenlegi irányelvei
Szűrés szérum tesztekkel (szérum szűrés) Down-szindrómára
Sejt nélküli magzati DNS technológia
Először 1963-ban találták meg, hogy a sejtek átjuthatnak anyától a magzatig, és kivonhatók, számszerűsíthetők és tanulmányozhatók. 1948-ban sejtmentes nukleinsavakat (sejtmembrán nélküli DNS- és RNS-fragmenseket) figyeltek meg először felnőtt szérumban. Ezek a sejtmentes nukleinsavak gyulladásos betegségekkel (lupus, glomeruláris nephritis, hasnyálmirigy-gyulladás), a gyors sejtforgalommal (mint a rák esetében is) és szövetkárosodásokkal (trauma, stroke, myocardialis infarctus) társulnak, és feltételezik, hogy elsősorban vérképző őssejtek. Mindez fontossá vált a terhesség alatt, amikor arról számoltak be, hogy az anyai plazmában és a szérumban magzati DNS található, amit a magzatból származó Y szekvenciák jelenléte bizonyít az anyai vérben. Sejtmentes magzati DNS feltételezhető, hogy a placentából származik (pontosabban az apoptózison áteső, gyorsan osztódó syncytiotrophoblastokból), mivel a sejtmentes magzati DNS genetikai aláírásai specifikusak a placenta génekre. Noha ezek a DNS-ek placenta sejtekből származnak, a DNS-fragmensek általában a magzat genetikáját is tükrözik, mivel a magzat és a placenta ugyanabból az embrióból származik.
A cfDNS magzati aránya az anyai vérben (az úgynevezett "magzati frakció") változó, de átlagosan a magzat és az anya többi részének 10% -át teszi ki. Korán észlelhető (a terhesség 5-7 hete), és órákon belül gyorsan kiürül az anyai keringésből: a magzati cfDNS felezési ideje egészséges nőknél körülbelül 1 óra, és az első 48-ban szinte teljesen eliminálódik az anyai keringésből. órával a szülés után. Ismert, hogy a magzati frakciót a terhességi életkor, az anya testtömeg-indexe és az aneuploidia megváltoztatja, míg más klinikai és demográfiai változók (anyai életkor, faj, ikerterhesség, fogantatás módja, dohány- vagy placenta térfogat) nem befolyásolják.
Néhány esetben, amikor a cfDNS-t alkalmazzák, a magzati szabad nukleinsavakat megkülönböztetik az anyai eredetűektől. Másokban, például az aneuploidiában, együttesen, a forrás megkülönböztetése nélkül hajtják végre őket. Az összes keringő cfDNS fragmentálva van, a fragmensek hossza 50-200 bázispár között van. A különböző kereskedelmi társaságok által kínált tesztekben alkalmazott módszertan eltérő.
A DS-szűréshez a cfDNS-t alkalmazó noninvazív prenatális vizsgálat fontos előrelépés a 35 évesnél idősebb nők szérumszűrésével szemben, mivel a legmagasabb kimutatási arányt (99% vs. 80-95%), a legalacsonyabb arányt mutatják. 2-15%) és a legmagasabb pozitív prediktív érték (80-99% vs. 2-4%). Ezenkívül egyetlen vérmintát igényel, amely bármikor elvégezhető a terhesség 10. hetétől kezdve. Az egyik hátrány, hogy a teszt teljes kudarcaránya valamivel magasabb nem invazív prenatális teszt: 0,3-3%, szemben a nem invazív prenatális teszt 98% -ával). Ez azt jelenti, hogy amikor a szérumszűrést használják fő vagy elsődleges szűrésként, a DS-vel rendelkező magzatok legfeljebb 20% -a nem jelenik meg pozitív szűrésként, ezért ezeknek a terhességeknek nem lesz előrehaladott szűrése a non-invazív prenatális teszt segítségével.
Kétségek merülnek fel a nem-invazív prenatális tesztre való áttérésre minden nő esetében, mivel az anyai szérummal végzett szűrés további információkat nyújt más magzati rendellenességekről, amelyek elvesznek, ha csak a nem invazív prenatális teszt. Azok a nők közül, akiket az anyai szérumszűrés pozitívan vizsgált, és a későbbi invazív tesztekben magzati kromoszóma-rendellenességeket detektáltak, 17-23% -uk olyan magzati kromoszóma-rendellenességeket mutat, amelyeket a jelenlegi nem invazív prenatális teszt nem mutatott volna ki. A noninvazív prenatális teszt által nem észlelt kromoszóma-rendellenességek közé tartoznak a kis deléciók és duplikációk, egyéb aneuploidiák, mozaikosság és tri/tetraploidia. Összességében körülbelül 2% annak a kockázata, hogy a kariotípusos rendellenességgel rendelkező magzatot a noninvazív prenatális teszt nem detektálja, hanem az anyai szérummal végzett szűréssel azonosították volna. Elképzelhető, hogy ezen magzatok némelyikének ultrahanggal azonosítható rendellenességei lennének, de ezek a rendellenességek csak a 18. héten láthatók.
Amikor az non-invazív prenatális tesztet alacsony kockázatú nőknél alkalmazzák, fontos megjegyezni, hogy a teszt pozitív prediktív értéke alacsonyabb lesz, mert a pozitív prediktív érték egy adott állapot eleve kockázatától függ az adott populációban . Így a 35 éves vagy annál fiatalabb nők esetében a pozitív prediktív érték összességében ~ 50% lehet; ez azonban lényegesen magasabb, mint a szérumszűrés pozitív prediktív értéke, amely 2-4%. Azokban a vizsgálatokban, amelyek a non-invazív prenatális tesztet vizsgálták bármilyen kockázatú nőknél, a pozitív prediktív érték 45 és 91% között változik (szemben a szérumszűrés 2,4-4,2% -ával). Ezenkívül a 13. és 18. triszómia általános álpozitív aránya magasabb a klinikai gyakorlatban, mint azt számos kereskedelmi vállalat jelentette. Az autoszomális aneuploidiákkal ellentétben várható, hogy a Turner-szindróma (45, X) pozitív prediktív értéke a non-invazív prenatális teszt alkalmazásával hasonló a fiatal és az idősebb nőknél, mivel ez a szindróma nem jár életkorral.
A hamis pozitív és hamis negatív eredmények okai a non-invazív prenatális tesztben
Hamis pozitív eredmények
A hamis pozitív arány a nem invazív prenatális tesztben a Down szindróma 0,1% (ez azt jelenti, hogy a cfDNS-teszt pozitív egy rendellenesség esetén, de később megerősíti, hogy a magzatot nem érinti). A legtöbb hamis pozitív eredmény a 21-es kromoszóma-specifikus DNS fokozott jelenlétének köszönhető, amelynek eredete nem tükrözi a magzat kromoszóma-összetételét abban a terhességben. Ezt a növekedést okozhatja a placenta (izolált placenta mozaikosság), egy kezdetben ikerterhesség, amelyben az egyik magzat később felszívódik), az anyai mozaikosság és más anyai problémák.