A kefir javítja a zsírmáj szindrómát azáltal, hogy gátolja a lipogenezis útvonalát egerekben

szindrómát

  • Tárgyak
  • Összegzés
  • Cél:
  • Eredmények:
  • Következtetés:
  • Bevezetés
  • Anyagok és metódusok
  • Kefirkészítés
  • Állattervezés és tanulmányozás.
  • Test felépítés
  • Energiapazarlás
  • Biokémiai markerek meghatározása.
  • Olajvörös folt O
  • Hematoxilin és eozin festés
  • Immunhisztokémiai festés
  • Valós idejű reverz transzkriptáz (RT) -PCR
  • Western Blot elemzés
  • statisztikai elemzés
  • Eredmények
  • A kefir hatása az étrendi bevitelre, a testtömegre, a máj súlyára, az alapanyagcsere sebességére és az energiafelhasználásra
  • A kefir hatása a testösszetételre
  • A kefir hatása a hepatomegaliara és a májkárosodásra
  • A kefir hatása a TG-re és a TC-re
  • A kefir hatása a májfunkcióval járó szérum biokémiai paraméterekre
  • A kefir kezelés hatása a lipid oxidációban és a lipogenezisben szerepet játszó gének expressziójára
  • A kefir elnyomja a lipogenezist
  • Vita
  • Kiegészítő információk
  • Képfájlok
  • 1. kiegészítő ábra
  • Word dokumentumok
  • 1. kiegészítő táblázat
  • 2. kiegészítő táblázat
  • Kiegészítő figura jelmagyarázat

Tárgyak

  • Anyagcsere
  • Alkoholmentes zsírmájbetegség
  • Elhízottság

Összegzés

Cél:

A zsírmáj betegség általában elhízással, inzulinrezisztenciával és cukorbetegséggel társul. A súlyos zsírmájat néha steatohepatitis kíséri, és hepatocelluláris carcinoma kialakulásához vezethet. Jelenleg nincs hatékony kezelés az alkoholmentes zsírmájbetegség (NAFLD) ellen; ezért a legújabb kutatások az ezen állapot kezelésére szolgáló hatékony terápiák kifejlesztésére összpontosítottak. Ennek a tanulmánynak a célja a kefir máj lipid anyagcserére gyakorolt ​​hatásainak értékelése ob/ob egerekben, amelyeket általában a zsíros májbetegségek modellezésére használnak.

Eredmények:

A kaukázusi hegységből származó kefir enyhén alkoholos, savas erjesztett tej. 5 Ezt az italt hagyományosan úgy állítják elő, hogy a tejet kefir gabonával oltják be. A kefirt klinikailag használták gyomor-bélrendszeri betegségek, magas vérnyomás, ischaemiás szívbetegségek és allergiák kezelésére. 5., 6. Számos tanulmány kimutatta a kefir számos biológiai aktivitását, beleértve az antibakteriális, gombaellenes, antioxidáns, antidiabetikus, daganatellenes és immunstimuláló hatásokat. Vujicic és mtsai. 7 azt mutatta, hogy a kefir fogyasztása csökkenti az emberek szérum koleszterinszintjét.

Ebben a tanulmányban azt vizsgáltuk, hogy a kefir kezelés javította-e a zsírmáj szindróma tüneteit inaktív leptin (ob/ob) génekkel rendelkező egerekben. A lipogenezis útjában szerepet játszó fehérjéket kódoló számos gén, köztük a szterin szabályozó elemet kötő 1-es fehérje (SREBP1), a zsírsav-szintáz (FAS) és az acetil-CoA karboxiláz (ACC), valamint az oxidatív lipid-útvonal, beleértve a A peroxiszóma proliferátorral aktivált a-receptor (PPARα) és a máj-karnitin-palmitoil-transzferáz-1α (CPT1α) kefir-kezelést követően mértük. A tanulmány célja a kefir zsírmáj-szindrómára gyakorolt ​​hatásának és mechanizmusának megértése volt, hogy elősegítse annak alkalmazását a NAFLD modulálásában vagy kezelésében.

Anyagok és metódusok

Kefirkészítés

A kefir starter szemcséket beoltottuk (5%, w/v), és sterilizált tejben szaporítottuk 20 ° C-on 20 órán keresztül, hogy aktiváljuk őket. A szemeket szitán kinyertük, újrakeményítettük (10%, tömeg/térfogat) sterilizált friss tejben, és 20 ° C-on inkubáltuk 20 órán át. 8 A szemek leszűrése után az erjesztett termékeket liofilizátorral liofilizáltuk kefirpor formájában (VirTis, Warminster, PA, USA).

Állattervezés és tanulmányozás.

Test felépítés

Az egész állat testösszetételét a minispec élő egér teljes testösszetétel-analizátorral (LF50) értékeltük TD-NMR-alapú adatok alapján (Bruker Optik, Ettlingen, Németország). Ez a módszer biztosítja az élő egerek zsírjának, zsírjának, szabad folyadékának és vízének pontos mérését.

Energiapazarlás

A közvetett kalorimetriához használt TSE LabMaster-3930 rendszer (Bad Homburg, Németország) kvantitatív számítógépes méréseket végzett az alapanyagcsere és az energiafelhasználás mérésére. Az oxigénfogyasztás (VO 2), a szén-dioxid-termelés (VCO 2) és a légzési hányados (VCO 2: VO 2 arány) kiszámításához nyomon követtük a gázkoncentrációkat a lezárt kamrák be- és kimeneténél. Az O 2 -fogyasztás és a CO 2 -termelés alapján számítottuk a bazális értéket (az éhomi állatok fényciklusa) és a teljes anyagcsere-sebességet (48 folyamatos óra a szabadon táplált állatok esetében). Az etetési epizódokat precíziós mérlegekkel figyeltük és folyamatosan rögzítettük az ételbevitel kiszámításához.

Biokémiai markerek meghatározása.

A GOT, GPT, TC és TC szinteket a szérumban és a májban kolorimetriásan mértük automatizált analizátorral (Beckman-Coulter Synchron LX20 analizátor; Beckman, Fullerton, Kalifornia, USA). 13.

Olajvörös folt O

A fagyasztott májszakaszokat (5–7 µm) 20–30 percig olajvörös O-val festettük, mostuk és 5 percig hematoxilinnel ellenfestettük a máj lipidfelhalmozódásának meghatározása érdekében. A reprezentatív mikroszkópos felvételeket 400-szoros nagyítással rögzítettük mikroszkópra szerelt kamera segítségével.

Hematoxilin és eozin festés

A májszövetet 10% -os pufferolt formaldehidben rögzítettük, és a fent leírt módon hematoxilin és eozin festéssel alkalmaztuk. 14, 15, 16

Immunhisztokémiai festés

A formaldehiddel rögzített és a paraffinba ágyazott szakaszokat 5 um vastagságúra vágjuk, elválasztjuk és vízben lévő alkoholok gradiensén keresztül rehidratáljuk, majd 15 percig forrásban lévő vízzel kezeljük. A metszeteket 3% -os hidrogén-peroxidban inkubáltuk 10 percig az endogén peroxidáz aktivitás blokkolásához, majd egy éjszakán át 4 ° C-on inkubáltuk primer nyúl SREBP-1 és ACC elleni monoklonális antitestekkel. Az antigén visszaszerzéséhez a metszeteket immunfestéssel készítettük a VECTASTAIN ABC kit (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA, USA) segítségével, a gyártó előírásait követve. A festés kialakulásához diaminobenzidint használtunk, és a metszeteket hematoxilinnel ellenfestettük. 17, 18 A negatív kontroll abból állt, hogy a normál szérumot primer antitesttel helyettesítettük.