A magas diétás étrendet fogyasztó anyák utódainak obesogén fenotípusa

- Tárgyak
- Összegzés
- Háttér:
- Cél:
- Mód:
- Eredmények:
- Következtetés:
- Bevezetés
- Anyagok és metódusok
- Állatok és diéták
- Orális glükóz tolerancia, súlygyarapodás és táplálékfelvételi teszt
- Szövetgyűjtemény
- Hipotalamusz gén expresszió
- Folátkoncentráció-elemzés
- Globális hipotalamusz DNS-metilációs elemzés
- Statisztikai elemzés
- Eredmények
- Ételbevitel, súlygyarapodás és glükózválasz
- Hipotalamusz gén expresszió
- Folát állapot
- Globális metilációs állapot
- Vita
Tárgyak
- Gén expresszió
- Hypothalamus
- Táplálék-kiegészítők
- Elhízottság
Összegzés
Háttér:
A Wistar patkányoknak a terhesség alatt táplált magas multivitamin-étrend (10-szeres AIN-93G, HV) növeli a metabolikus szindróma jellemzőit az utódokban, amikor az ajánlott vitamin-étrendtől elválasztják.
Cél:
Annak meghatározása, hogy a terhességi HV-diéták az obesogén fenotípusokra gyakorolt hatásai az utódokban a táplálkozási viselkedés megváltozott hipotalamusz-kontrolljának következményei-e, és hogy megnövekedett táplálékbevitelük megakadályozható-e HV vagy magas foláttartalom (a folát 10-szerese, HFol 10-szerese) táplálásával. diéták
Mód:
Az RV, HV vagy HFol diétával elválasztott terhesség alatti HV-diétával táplált anyák hím utódait összehasonlították a RV-gát anyáktól született és 29 hétig RV-diétával elválasztott anyákkal. A 72 órán át tartó táplálékfelvételt kéthetente, a testtömeget pedig hetente mértük. A glükózterhelésre adott glükózválaszt az elválasztás után 18 héttel mértük. Az étellel kapcsolatos neuropeptidek, köztük az Y neuropeptid, a pro-opiomelanokortin (POMC), az inzulin receptor, a leptin receptor, az agyi eredetű neurotróf faktor (BDNF), a dopamin receptorok (DopaR1/2/5) és a szerotonin (SeroR1A/2A/2C), valamint a globális DNS-metilációt, valamint az agy és a plazma folátkoncentrációit az elválasztást követő 29. héten mértük.
Eredmények:
A HV vagy HFol kölyökkutya növelte az agy és a plazma folátkoncentrációját, és megakadályozta a megnövekedett táplálékfelvételt (5%, P = 0,03), a testsúlyt (8%, P = 0,0006) és a glükózterhelésre adott glükózválaszt (36%, P = 0,02) ) találtak a lakóautó-étrendet fogyasztóknál Az anorektikus POMC (P = 0,004) és a BDNF (P = 0,02) expressziója magasabb volt, és a DopaR1 alacsonyabb (P = 0,06) volt a HV étrenddel etetett kölyökkutyákban. A HFol kölyökkutya a BDNF-et részben a kontroll szintre hozta (P = 0,02) és csökkentette a SeroR2A értékét (P = 0,008). Más gének expresszióját ez nem befolyásolta. A teljes DNS-metiláció hasonló volt az étrendcsoportok között.
Következtetés:
A HV-vel táplált zsákmány utódainál az obesogén fenotípust a HV vagy HFol kölyökkutya etetésével lehet megakadályozni, valószínűleg a táplálékfelvétel szabályozási mechanizmusainak elválasztást követő modulációja miatt.
Bevezetés
Anyagok és metódusok
Állatok és diéták
A vizsgálat sematikus ábrája ( nak nek ) tervezés és ( ) protokoll a hím utódok számára az elválasztást követő 0–29 héttel. Diéta rövidítések: RV, az AIN-93G étrend ajánlott vitaminokkal; HV, az ajánlott multivitamin-keverék tízszerese; HFol, RV + a foláttartalom tízszerese. A terhesség alatt elfogyasztott étrendek a kötőjel előtt jelezték. Az utódok által elfogyasztott étrendeket a szaggatott vonal után jelöljük.
Teljes méretű kép
Orális glükóz tolerancia, súlygyarapodás és táplálékfelvételi teszt
Az 1b. Ábra a vizsgálati protokollt írja le. A 72 órán át tartó táplálékfelvételt kéthetente, az elválasztást követő 0–29. Héten mértük. A testtömeget a születéskor és az elválasztáskor mértük, és a súlygyarapodást heti 0-29 héttel számoltuk el a választás után. A glükózszondára adott glükózválaszt (0,375 g glükóz/ml, 5 g glükóz/testtömeg-kilogramm) az elválasztás után 18 héttel mértük. A patkányokat egy éjszakán át 10 órán át éheztettük a glükóz mérése előtt. Vérmintát vettünk a farokvénából, és a bazális glükózt azonnal teszteltük egy kereskedelmi forgalomban lévő glükométerrel (MediSense Precision Xtra, Abbott Laboratories, Abbott Park, IL, USA). A glükózmérés után 15 és 60 perccel később meghatároztuk a vércukor-koncentrációt, és kiszámítottuk a görbe alatti inkrementális területet.
Szövetgyűjtemény
Az egész patkány agyat a leválasztás után 29 héttel lefejezés után gyorsan eltávolítottuk, és azonnal szárazjégre fagyasztottuk, majd -80 ° C-on tároltuk. Az agyakat jégen felolvasztottuk, és a hipotalamusz jobb és bal oldalát külön szétvágtuk. fent leírt módszerrel. 14 A hipotalamusz elülső részének elhatárolásaként az optikai chiasmát használták. Ez áthalad az elülső komisszáron, amelyet vízszintes határként használtak. A hátsó hipotalamusz és a mammilláris testek közötti vonal farokmetszetnek számított. A boncolt hipotalamusz blokkok komplex preoptikus, szupraoptikus, paraventrikuláris, elülső, suprachiasmatikus, dorsomedialis, ventromedialis, arcíves, mammilláris, posterior és laterális magokat tartalmaztak. A hipotalamusz jobb oldalát használtuk a gén relatív expressziójához, a bal oldalt pedig a DNS metilációs státuszához. A fennmaradó agy bal oldalát használtuk a folátkoncentráció mérésére. A törzsvért összegyűjtöttük és centrifugáltuk, majd a folát oxidációjának megakadályozása érdekében plazmamintákat adtunk hozzá 0,5% aszkorbinsavval.
Hipotalamusz gén expresszió
Mindegyik boncolt hipotalamust szövetrepedéses homogenizátorral homogenizáltuk (Qiagen Tech., Mississauga, ON, Kanada). A homogenizált minták RNS-ét Trizol reagens alkalmazásával izoláltuk, és kloroformmal extraháltuk a gyártó protokollja szerint (Invitrogen, Grand Island, NY, USA), és a Nanodrop 1000-vel számszerűsítettük. az ABI (Applied Biosystems, Foster City, Kalifornia, USA) Gene Amp PCR rendszer 2700.