A magas zsírtartalmú étrend által kiváltott Tgf-β gbb jelátvitel rezisztenciához vezet
- Tárgyak
- Összegzés
- Bevezetés
- Eredmények
- A kifejezés kifejezése gbb utánozza a HFD fenotípusokat Drosophila
- A Gbb jelátvitel gátlása megmenti a HFD által kiváltott elhízást és a diabéteszes fenotípusokat
- apróságok a Gbb jelzés egy downstream célpontja
- apróságok negatívan szabályozza az inzulin jelátvitelt
- a gátlása apróságok elnyomja az elhízás okozta gbb és a diabéteszes fenotípus
- Vita
- Anyagok és metódusok
- Drosophila melanogaster készletek
- Sejtkultúra, stimuláció és transzfekció.
- HFD és teljesítmény
- A test TG szintjének mérése
- Trehalóz/glükóz szint mérése hemolimfában
- RNS tisztítás és kvantitatív RT-PCR elemzés
- Kultúra ex vivo kövér felnőtt testek
- Western blot és immunfestés
- Forgács
- Luciferáz riportervizsgálat sejtekben Drosophila S2
- statisztikai elemzés
- további információ
- Kiegészítő információk
- PDF fájlok
- Kiegészítő információk
- Hozzászólások
Tárgyak
Összegzés
Bevezetés
A HFD-vel táplált legyek rendellenes glükóz- és lipidszintet és inzulinrezisztenciát mutattak, hasonlóan az elhízott emlősökhöz. A HFD által kiváltott inzulinrezisztenciát a Gbb törzsi út aktivitása közvetítette a zsír testben. Ezért a Gbb törzsi szignálozás célzott gátlása új terápiás stratégiát jelent az elhízás és a kapcsolódó anyagcsere-betegségek kezelésében.
Eredmények
A gbb expresszió indukálása utánozza a HFD fenotípusokat Drosophilában
A HFD 14. napján megmértük a TGF-β szupercsalád hét ligandumának expressziós szintjét a kifejlett légy zsírtartalmában. A tesztelt tényezők közül csak a gbb-expresszió növekedett szignifikánsan a HFD-táplálással (1A. Ábra), különösen a zsír testben (S2A. Ábra). Ezután megvizsgáltuk, hogy a gbb megváltoztathatja-e a zsír testében a TG és a hemolimfa trehalóz/glükóz szintjét. A gbb túlzott mértékű expressziója a felnőtt zsír testben (DCG> gbb) növelte a TG és a trehalóz/glükóz szintjét a kontrolllegyekéhez (DCG-Gal4/+) képest (1B. Ábra). A gbb túlzott expressziója azonban a belekben (NP3084> gbb) vagy az izmokban (MHC> gbb) nem változtatta meg a TG szintjét (S2B ábra). Továbbá a pAKT szintje szignifikánsan csökkent a zsírból származó gbb-ben (DCG> gbb), a bélben vagy az izomban levő gbb-ben azonban nem (S2C ábra).
A gbb túlzott expressziója a felnőtt zsír testben (pS106 GS> gbb + RU) jelentősen megnövelte a Dilp2 expresszióját, és kissé megnövelte a Dilp3 és a Dilp5 expresszióját a -RU kontrollok szintjéhez viszonyítva (1E ábra). Annak eldöntésére, hogy a gbb szabályozza-e az inzulin jelátvitelt, a legyek pS106 GS> gbb + RU vagy -RU kifejlett zsírtartalmát boncoltuk fel, és ex vivo inzulinnal kezeltük őket (S2E ábra). Az -RU kontrollokban az ex vivo inzulinkezelés növelte a pAKT szintjét a kezeletlen mintákhoz viszonyítva. Éppen ellenkezőleg, a legyekből + RU-ból nyert mintákban, amelyek túlzottan expresszálták a gbb-t a felnőtt zsír testben, az ex vivo inzulinkezelés nem növelte a pAKT szintjét (1F. Ábra).
Az inzulinszignalizáció gbb által történő szabályozásának további vizsgálatához megvizsgáltuk a dFOXO szubcelluláris lokalizációját lárva zsírtestekben, a specifikus zsírtest-kontroller DCG-Gal4 alkalmazásával. Ezekben a kísérletekben a boncolt zsírtesteket szérumtól megfosztották és ex vivo humán inzulinnal kezelték. A DCG-Gal4 éhezési kontrollban és a DCG> gbb zsírtestekben a dFOXO főleg a magokban lokalizálódott (1G. Ábra, I. ábra). Az inzulinstimuláció után a dFOXO fehérje majdnem az egészet a citoplazmában helyezte át a kontroll zsírtestekben, a DCG-Gal4 (1H ábra), míg a DCG> gbb zsírtestekben a dFOXO fehérje többsége még mindig magokban volt (1. ábra). 1J). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a zsír testében a gbb túlzott expressziója gátolja az inzulin jelátvitelt, ami egy inzulinrezisztens fenotípust eredményez, amely hasonló a hosszú távú HFD tápláláshoz.
A Gbb jelátvitel gátlása megmenti a HFD által kiváltott elhízást és a diabéteszes fenotípusokat
( NAK NEK ) A triglicerid és a trehalóz/glükóz szint a pS106 GS> trb + RU-ban nőtt az −RU kontrollokhoz viszonyítva. ( ) HFD állapotban a zsír testében a trb csökkenése elnyomta a trigliceridek és a trehalóz/glükóz emelkedett szintjét. ( C, D ) A trb eliminációja a zsír testben, amely túlzottan expresszálja a gbb-t (pS106 GS> gbb + trb RNAi + RU), elnyomta az emelkedett triglicerid- és trehalóz-/glükózszinteket, amelyeket a pS106 GS> gbb + RU-ban figyeltek meg. Az adatokat legalább három független kísérlet átlagának ± féléveként adjuk meg. * P 4, 5, ami viszont olyan másodlagos betegségeket okoz, mint például az inzulinrezisztencia 6. Ebben a tanulmányban bebizonyítottuk, hogy a HFD által kiváltott elhízás kiváltja a TGF-β jelátvitelt, amely visszafogja az inzulin jelátvitelt a zsír testben. Bemutatjuk a triplák, a TGF-β/Gbb jelátvitel új célpontjának szerepét az inzulinrezisztencia kialakulásában is.