Az rna hur kötő fehérje a citovédelmet közvetíti a stimuláció révén

kötő

  • Tárgyak
  • Összegzés
  • Bevezetés
  • Eredmények
  • A HuR kölcsönhatásba lép az XIAP IRES-szel
  • A HuR közvetlenül kötődik az IRES XIAP RNS-hez
  • A HuR sejtszintje modulálja az XIAP IRES aktivitását
  • A HuR sejtszintje modulálja az endogén XIAP mRNS transzlációját
  • A XIAP HuR által közvetített indukciója megvédi a sejteket az etopozid által kiváltott sejthaláltól
  • Vita
  • Kiegészítő információk
  • Képfájlok
  • 1. kiegészítő ábra
  • Word dokumentumok
  • Kiegészítő figura jelmagyarázat

Tárgyak

  • Sejtpusztulás
  • RNS-kötő fehérjék
  • Fordítás

Összegzés

A sejtes kaszpáz XIAP belső inhibitorának expresszióját főleg a fehérjeszintézis szintjén szabályozzák. Az 5 'transzlálatlan régió belső riboszóma belépési hely (IRES) motívumot tartalmaz, amely sejtes stressz körülményei között támogatja az XIAP mRNS cap-független transzlációját. Ebben a tanulmányban megmutatjuk, hogy az RNS-kötő HuR fehérje, amelyről ismert, hogy anti-apoptotikus sejtprogramot szervez, stimulálja az XIAP mRNS transzlációját az IRES XIAP-en keresztül. Továbbá megmutatjuk, hogy a HuR in vitro és in vivo kötődik az XIAP IRES-hez, és stimulálja az XIAP mRNS poliszómákba történő toborzását. Fontos, hogy az apoptózist kiváltó etopozid ágens védelme a HuR túlzott expressziójával XIAP jelenlétét igényli, ami arra utal, hogy a HuR által közvetített citoprotekció részben megvalósul az XIAP fokozott transzlációján keresztül. Adataink arra utalnak, hogy az XIAP az anti-apoptotikus gének HuR által szabályozott RNS operonjához tartozik, amely a Bcl-2, Mcl-1 és ProTα-val együtt hozzájárul a sejtek túlélésének szabályozásához.

Bevezetés

Az apoptózis X-kapcsolt inhibitora (XIAP) az apoptózis fehérje család inhibitorának prototípus-tagja. A XIAP számos különféle funkciót lát el a sejten belül, beleértve a receptor által közvetített szignáltranszdukció modulálását, a fehérje ubiquitációját és elsősorban a kaszpáz közvetlen gátlását és ezáltal a sejtek túlélésének szabályozását (áttekintve Liston és mtsai., 2003; Dubrez-Daloz és mtsai. 2008) Bár nem írtak le olyan mutációkat, amelyek a XIAP-t társítják az onkogén transzformációhoz, a rák különböző típusaiban megemelkedett XIAP-szintről számoltak be, és a kemoterápiával és a sugárzással szembeni fokozott rezisztenciával társultak (Tamm és mtsai., 2000, 2004a, 2004b; Holcik és mtsai, 2000b; Yoon és mtsai, 2006; Gu és mtsai, 2009). Az XIAP expresszió célzásának terápiás potenciálját a közelmúltban számos klinikai vizsgálat bizonyította (Schimmer és mtsai, 2005, 2009; Dean és mtsai, 2007, 2009).

Az XIAP sejtszintjét több különböző mechanizmus szabályozza, de úgy tűnik, hogy az uralkodó szabályozás a transzláció iniciációjának szintjén van (Holcik, 2003). Az XIAP mRNS 5 'nem transzlált régiója (5' UTR) egy belső riboszóma belépési hely (IRES) motívumot hordoz magában, amely az XIAP mRNS hatékony transzlációját hajtja végre sejtes stressz körülményei között, amikor a globális transzláció a kupaktól függ (Holcik et al., 1999; Yoon és mtsai, 2006; Gu és mtsai, 2009). A sejtes mRNS-ek IRES-vezérelt transzlációja a közelmúltban a szelektív transzláció fontos szabályozójaként jelent meg, különösen hipoxia, endoplazmatikus stressz vagy szérum éhezés esetén (Holcik et al., 2000a; Holcik és Sonenberg, 2005). Ezek a körülmények gyakran jelen vannak a daganatokban, és sok rákos sejt túlélésükhöz specifikus mRNS-ek IRES által közvetített transzlációját igényli (Braunstein és mtsai, 2007; Silvera és mtsai, 2009). Noha azonosították a cap-függő transzláció IRES-re történő változását (Braunstein és mtsai, 2007), a sejtfehérjék pontos mechanizmusai és kohorszja, amelyek hozzájárulnak az IRES-függő transzláció szabályozásához, nem tisztázottak.

A XIAP IRES 162 nukleotid hosszúságú, és különálló RNS-szerkezetet alkot (Baird et al., 2007). Korábban jellemeztük az XIAP IRES szekvenciáját és szerkezeti jellemzőit (Holcik et al., 1999; Baird et al., 2007), és elkezdtük tisztázni az aktivitását szabályozó mechanizmust. Mi és mások azonosítottuk az IRES transzakciós faktorokat (ITAF), sejtes fehérjéket, amelyek specifikusan kötődnek és szabályozzák az IRES XIAP-t. Érdekes, hogy bár ezek közül a tényezők közül néhány stimulálja az XIAP IRES funkciót (Az autoantigén (Holcik és Korneluk, 2000); hnRNP C1/C2 (Holcik és mtsai, 2003); mdm2 (Gu és mtsai, 2009)), a többiek igen elnyomás (hnRNP A1 (Lewis és mtsai, 2007); PTB (Baird és mtsai, 2007)). Az IRES XIAP ribonukleoprotein komplex (RNP) jellege és az összes ITAF XIAP identitása azonban továbbra sem ismert.