A follikulus-stimuláló hormon (FSH) nappali pulzáló szekréciója a prepubertális anyajuhokban, anélkül is
A pulzáló follikulusstimuláló hormon (FSH) szekréciója a pubertás kor előtti nőstény juhokban táplálékkorlátozással és anélkül
S. E. RECABARREN, Biol., M.Sc. A. LOBOS, M. V., Mg.S. O. POBLETE, M. V.; P. MUÑOZ, J. PARILO, Ing. Agr. Állatorvosi Kar Állatfiziológiai és Endokrinológiai Laboratórium,
Concepcióni Egyetem, Campus Chillán
* A FONDECYT 1990389 projekt finanszírozta.
ÖSSZEFOGLALÁS
Kulcsszavak: FSH, juh, pubertás, táplálékkorlátozás.
Kulcsszavak: FSH, bárányok, pubertás, táplálékkorlátozás.
BEVEZETÉS
Jelen munka célja az volt, hogy felismerje az FSH diurnális pulzáló szekréciójának jellemzőit 6-10 hétig korlátozott táplálkozású prepubertális anyajuhokban, és összehasonlítsa őket az anyajuhok azonos korú táplálékkorlátozás nélküli szekréciójával.
ANYAG ÉS MÓDSZEREK
FSH pulzilitási vizsgálat. Az FSH pulzilitási vizsgálata vérminták (3 ml) összegyűjtéséből állt az előzőleg beültetett jugularis katéteren keresztül, 10 perces időközönként, 5 órán át (10: 00-15: 00 óra) 20, 26 és 30 héten keresztül. életkorától kezdve, a kísérleti csoport 0,6 és 10 hetes táplálékkorlátozása után. A vérmintákat heparinizált csövekbe helyeztük (10 NE heparin/ml vér), majd 1000 x g-vel 15 percig centrifugáltuk, a plazmát elválasztottuk és 20 ° C-on fagyasztottuk le, amíg a plazma FSH-koncentrációit később elemeztük. radioimmunoassay (RIA) által.
FSH radioimmunassay. Az FSH radioimmun vizsgálatot az NIADDK (USA) anyagával végeztük, az anyagokkal feltüntetett protokoll szerint. Röviden: 200 µl standard juh-FSH-t (oFSHRP) 0,02–25,6 ng/cső tartományban vagy 200 µl ismeretlen mintát inkubáltunk 100 µl jódozott FSH-val (oFSH I-1 AFP 5679 C) és 100 µl antiszérummal. juh juh FSH ellen (AFP C 5228113) 24 órán át szobahőmérsékleten. Ezután 100 ul második antitestet adunk hozzá, és az inkubálást 48 órán át folytatjuk. Ezt követően a csöveket 1000 x g-vel 40 percig 4 ° C-on centrifugáltuk, a felülúszót eldobtuk, és a pelletet LKB gamma-spektrométerrel meghatároztuk. A kontrollpuffer 90% -ának megfelelő minimális kimutatható koncentráció 0,2 ng/ml volt, a vizsgálaton belüli variációs koefficiens 6% és az inter-assay 10% volt.
A pulzáló FSH szekréció jellemzőinek meghatározása. Az egyes juhok plazma FSH-koncentrációit külön-külön elemeztük a Veldhuis és Johnson (1986) által kifejlesztett CLUSTER számítógépes programmal. Ez a program ismétlődő algoritmus segítségével lehetővé teszi az egymást követő mintasorozatban impulzusként definiált hormonális ingadozások azonosítását az RIA variációs együtthatójának, a mintavételi frekvenciának, az operátor által kijelölt impulzus meghatározott formájának felhasználásával ( 1 vagy több pontot használva a csúcshoz és egy vagy több pontot a legalacsonyabb értékhez), és a pontok közötti statisztikai különbségeket. A program meghatározza az impulzusok átlagos amplitúdóját, az impulzusok közötti intervallumot, az impulzusok időtartamát és a legalacsonyabb értéket (az impulzusok közötti plazmakoncentrációk átlaga). Az FSH impulzusok azonosításához 3x3 impulzus alakot választottunk a maximum és a minimum meghatározásához, 2,75-ös t teszttel (Veldhuis és Johnson, 1986). Ezzel az eljárással a hamis pozitív impulzus azonosításának valószínűsége kevesebb mint 5% volt.
Statisztikai elemzés. Az FSH pulzáló szekréciójának paraméterei: az időszak keresztmetszeti átlaga (ng/ml/5 óra), impulzus frekvencia (impulzusok száma/5 óra), az impulzusok amplitúdója (ng/ml) és a legalacsonyabb érték (ng/ml) A 20., 26. és 30. héten jelen lévő elemzéseket ugyanabban a csoportban elemeztük blokktervezésű ismételt minták varianciaanalízisével, összehasonlítva a GB.Stat v.6 statisztikai programot használó Newman Keuls teszttel mért átlagokat. Az adatok átlag ± standard hiba formájában vannak feltüntetve. A P 0,05 értéket vettük figyelembe. Másrészről az élelmiszer-korlátozás alá eső anyajuhok esetében tendencia volt megfigyelhető a 20 és 30 hetes kor közötti csökkenésre, 10 hetes korlátozás után. Az FSH átlagos plazmakoncentrációja (ng/ml/5 óra) a kísérleti anyajuh csoportban több mint 50% -kal volt alacsonyabb, mint a kontroll anyajuhok FSH plazmakoncentrációja (P> 0,05).
Amint az 1. táblázat mutatja, az FSH impulzusok gyakorisága nem mutatott statisztikai különbségeket az azonos csoportba tartozó korok vagy a csoportok között. Az FSH impulzusok amplitúdója a kontrollcsoportban 20-30 hetes kor között nőtt, több mint 50% -kal csökkent a 20-30 hetes kor közötti korlátozott táplálkozású anyajuhoknál (P> 0,05). Az impulzusok amplitúdója alacsonyabb volt az élelmiszer-korlátozással rendelkező anyajuhokban, mint a kontrollcsoportban 30 hetes korban (P = 0,079), 10 hét étkezési korlátozás után.