A pax8 expressziója normál és neoplasztikus veseszövetekben immunhisztokémiai vizsgálat -

normál

  • Összegzés
  • Fő
  • Anyag és módszerek
  • Eredmények
  • Kifejezés kifejezése PAX8 normális felnőtt vese, ureter és húgyhólyag esetén
  • Kifejezés kifejezése PAX8 vese hámdaganatokban
  • Kifejezés kifejezése PAX8 a vesemedence, az ureter és a húgyhólyag urotheliális carcinomájában
  • Kifejezés kifejezése PAX8 metasztatikus RCC-ben
  • Vita

Összegzés

Fő

A sejtsor-specifikus transzkripciós faktorok a közelmúltban jelentek meg az emberi tumorok értékes diagnosztikai markereiként. Ezek a fehérjék korlátozott típusú embrionális szövetekben expresszálódnak, és szükségesek e szövetek növekedéséhez és differenciálódásához erősen specializált szövetekké vagy szervekké. Mivel egyes fehérjék továbbra is differenciált szövetekben expresszálódnak a felnőtt élet során, vagy azonos sejtvonalú daganatos szövetekben, ezeknek a fehérjéknek a kimutatása jelezheti a tumor elsődleges helyét vagy differenciálódási tulajdonságát. Ebben a kategóriában jól megalapozott diagnosztikai markerek a TTF-1, 1, 2 CDX2, 3 MITF, 4 és a myogenin. 5, 6

A vesesejtes karcinóma (RCC) hajlamos a vaszkuláris invázióra és a távoli áttétekre. Az esetek jelentős részében extrarenalis növekedés vagy metasztázis fordul elő a diagnózis felállításakor vagy a műtét után. Különböző szövettani jellemzői miatt az áttétes RCC diagnosztikai kihívás lehet, és megerősítéséhez gyakran kiegészítő teszteket, például immunhisztokémiát igényel. 8 Számos gyártó, köztük a citokeratinok (CK), CK7, CK20, EMA, vimentin, 9 c-kit, 10 P504S, 11 RCC marker, 12, 13 aquaporin-1, 14 CD10, 15 és karbonanhidráz 9 (CAIX) 16, 17-et használtak különböző paneleken, változó érzékenységgel és specifitással.

Anyag és módszerek

Száznegyvenhárom primer és 39 metasztatikus vese hámdaganatot alkalmaztak ebben a vizsgálatban. Az elsődleges vese hámdaganatminták radikális nephrectomia mintákból származnak, és öt szövetből álló mikrorétegeken állítják össze, mindegyik esetben három reprezentatív 1 mm-es maggal. Metasztatikus daganatokból származó hagyományos szövetmetszeteket alkalmaztunk. A húgyhólyag negyven urotheliális karcinómája szintén egyetlen szöveti mikroszkópba került, amelyet ugyanúgy hoztak létre, mint az elsődleges vese hámdaganatok esetében. A normál szövetkontroll 40 nem befolyásolt vese parenchima magot tartalmazott a szövetmikrosávokban, valamint a nem érintett vesemedencei területek szövetszelvényeit (N = 5), uretereket (N = 5) és a húgyhólyagot (N = 10).

Az immunhisztokémiai PAX8 festést Dako önfestéssel végeztük nyúl anti-PAX8 poliklonális antitesttel (1: 100) (Poteintech, Inc., Chicago, IL, USA). Röviden, paraffinba ágyazott szövetrészeket (5 μm vastagságot) nyertünk TMA-ból vagy szövetblokkokból, és egy éjszakán át 60 ° C-os sütőben sütöttünk. A metszeteket szekvenciálisan paraffinmentesítettük és dehidráltuk PRO-tisztítóval. PAR (Anatech, Battle Creek, MI, USA) USA) Az alkohol és a víz csökkenő koncentrációinak sorozatában. Az antigén visszanyerését úgy hajtottuk végre, hogy a metszeteket 40 percig pároltuk, majd 20 percig hűtöttük etilén-diamin-tetraecetsav (EDTA) oldattal ellátott sejtcímke-trilógiában. Az antigén visszanyerése után a metszeteket Tris-pufferolt oldattal inkubáltuk Tween-20-mal 5 percig, majd betöltöttük a Dako automatizált festőrendszerbe. Az EnVision rendszert (Dako) alkalmazták az elsődleges antitest vizualizálására hematoxilin ellenfestéssel.

A PAX8 antitest érzékenységét és specifitását különféle normál szövetekkel validálták, és csak a különálló magfestést tekintették pozitívnak a PAX8 szempontjából. A diffúz pozitív festést a PAX8-ra pozitívan festő tumorsejtek 50% -ának nevezik; egyébként a festést fokálisan pozitívnak tekintették. Metasztatikus RCC-k esetén azokat az eseteket tekintették pozitívnak, amelyeknél a PAX8 esetében a tumorsejtek festése> 5% volt. A tumorokban a PAX8 festés intenzitását gyengének (1+), mérsékeltnek (2+) és erősnek (3+) minősítették.

Eredmények

PAX8 expresszió normális felnőtt vesében, ureterekben és húgyhólyagban

PAX8 festést detektáltunk a proximális és disztális vese tubulusok hámsejtjeiben, a Henle hurkaiban, a gyűjtőcsatornákban és a Bowman-kapszula parietális hámsejtjeiben (1a. És b. Ábra). A festés mindig erősebb volt a disztális tubulusokban, a Bowman-kapszula parietális sejtjeiben és a gyűjtőcsatornákban (3+), mint a proximális tubulusokban (1+), amelyeknél nemspecifikus citoplazmatikus festődést is megfigyeltek. Erős PAX8 (3+) festést detektáltunk a bélelő urotheliális sejtek minden rétegében a vesepapillában és a vesemedence kezdeti részében. A disztális vesemedencében és az ureterekben a PAX8-pozitív sejtek fokozatosan az urothelium közbenső vagy bazális rétegeire korlátozódtak, csökkent festési intenzitással (2+) (1c-e ábra). A húgyhólyag urotheliumában nem volt PAX8 festés (1f. Ábra). A PAX8 festést nem detektálták a podocytákban, a mesangialis sejtekben, az endothel sejtekben, illetve a vese interstitium vagy nyirokerekében.