A bal pneumonectomia monokrotalinnal vagy sugennel kombinálva, a pulmonalis magas vérnyomás modelljeként

Összegzés

A bal rágcsáló pneumonectomia értékes technika a pulmonalis hipertónia vizsgálatában. Itt bemutatunk egy protokollt a patkány pneumonectomia eljárásának és a posztoperatív ellátásnak a minimális morbiditás és mortalitás leírására.

Absztrakt

Bevezetés

A pulmonalis artériás hipertónia (PAH) egy progresszív és halálos kimenetelű betegség, amelyet fokozott pulmonális véráramlás, megnövekedett érellenállás, gyulladás és a kis pulmonalis erek átalakulása jellemez. Ez az átalakítás általában vaszkuláris elváltozásokat eredményez, amelyek elzárják és kitörlik a kis tüdőartériákat, érszűkületet és a jobb kamra megnövekedett utóterhelését okozva. A PAH-nak van néhány sikeres farmakológiai kezelése; ennek következtében a PAH továbbra is magas mortalitással rendelkezik. A közelmúltban a pulmonalis hipertónia patobiológiájának kutatási fókusza egy olyan mechanizmus felé mozdult el, amelyben a fokozott pulmonális véráramlás szerepét a pulmonalis vaszkuláris angio-proliferáció átalakításának fontos kiváltó tényezőjének tekintik 3, 4 .

A kézirat újdonságát a patkányok baloldali pneumonectomiájának nagyon részletes és teljes műtéti protokollja, valamint e modellek technikai és fiziológiai kihívásainak tárgyalása mutatja be. Mivel ez a protokoll jelenleg nem áll rendelkezésre, sok kutató úgy véli, hogy a modell túl nehéz. Azok a kutatók, akik bal pneumonectomiát végeztek, magas halálozási és morbiditási rátával szembesülnek, szükségtelen állatok elvesztésével járva, veszélyeztetve a tudományos értékelést. Ehelyett sokan olyan klasszikus modelleket alkalmaznak, mint az MCT injekció, a krónikus hipoxia vagy a pneumonectomia a PAH létrehozására. Ezek a modellek azonban sokkal kevésbé hatékonyak, mint az MCT vagy a Sugen és a bal pneumonectomia kombinációja. A cikk fő célja az első részletes és reprodukálható műtéti protokoll kidolgozása patkányok egyoldalú baloldali pneumonectomiájához és a PAH legjobb műtéti modelljének biztosítása. A baloldali egyoldalú pneumonectomia protokolljának MCT-vel vagy SU5416-tal történő kombinálása lehetővé teszi a kutatók számára, hogy egy sokkal hatékonyabb és klinikailag relevánsabb súlyos PAH-modellt hozzanak létre e halálos betegség patogenezisének tanulmányozásához.

Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.

Jegyzőkönyv

Az alábbiakban ismertetett eljárásokat a Sínai-hegység Icahn Orvostudományi Iskolájának intézményi állatgondozási és -használati bizottsága (IACUC) hagyta jóvá. Minden humánus gondozásban részesült patkány megfelel a Sínai-hegy "Útmutató a laboratóriumi állatok gondozásához és használatához" című dokumentumnak.

1. felkészülés a műtétre

1. Cooley-Mayo autokláv ívelt olló (nagy olló), egyenes Iris olló (kicsi olló), Vannas McPherson írisz olló (hátsó olló), Wangensteen szövetcsipesz (atraumatikus csipesz), Gerald szövet csipesz, sima huzal tüske (önmegőrző visszahúzó), kishajó-cauterizer, gézpárnák, kettős szonda, finom vaszkuláris tűtartó és Jacobson Micro szúnyog vérzéscsillapító csipesz (szúnyog).

2. patkányok előkészítése és intubálása

3. steril környezet előkészítése

1. Vizualizálja a műtéti területet a mikroszkóp alatt. Ezt először meg kell tenni, mert a mikroszkóp nem állítható be, ha a környezet steril.
2. Vegyen fel steril sebészeti kesztyűt. Ne érintse meg a steril eszközöket, a sebészeti kendőket és a patkány testének műtéti területét!.
3. Helyezzen steril kendőt a patkány testére és a műszer tálcára, hogy steril környezetet teremtsen.
4. Steril kesztyűt viselve helyezzen steril műszereket a steril műszertálcára.

4. Bal műtéti eljárás Pneumonectomia

5. posztoperatív gyógyulás

1. Helyezze az állatot szegycsontba. Kapcsolja ki az izofluránt, de továbbra is adjon oxigént a patkánynak az endotracheális csövön keresztül. Soha ne hagyja az állatot felügyelet nélkül, amíg nem kapott elegendő tudatot a járáshoz, és az állatot a ketrecében.
2. Adjon szubkután 2-3 ml steril, melegített Ringer-oldatot.
3. Figyelje a pulzusszámot (≈200 - 500 ütés/perc), az oxigéntelítettséget (≥95%) és az állati színt annak megerősítésére, hogy az állat jól lélegzik.
4. Amikor az állat spontán légzési és nyaki mozgásokat kezd végrehajtani, és reagál a fizikai ingerekre (például a szemek tágra nyílása, az orr és a fül mozgása a hangra reagálva), a csövet kihúzva extrudálja az állatot, és válassza le a ventilátort.
5. Helyezze vissza az állatokat egy üres ketrecbe, más állatok társaságában. Az állatnak legalább 3 napig egyedül kell lennie.
6. A fájdalom visszaszorítására adjon 0,1 mg/kg buprenorfint szubkután 12 óránként 3 napig.

6. "Second Strike" MCT vagy Sugen adminisztráció

1. Adjon be 1 ml MCT-t (60 mg/kg) vagy 1 ml cukrot (25 mg/kg) szubkután, egy héttel a műtét után.

7. betakarítási terminál

Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.

Reprezentatív eredmények

Az elfogadott osztályozási rendszer szerint a pulmonalis hipertóniát az átlagos pulmonalis artéria nyomás (MAPP) jellemzi, amely meghaladja a normális pulmonalis artéria nyomás felső határát (azaz 25 Hgmm). A pneumonectomia + MCT csoportban súlyos PAH alakult ki a 21. napra magasabb PAPM mellett (1. ábra). Az mPAP kiszámítása a következő képlettel történik:

---